糖基化基质影响人皮肤成纤维细胞增殖凋亡的研究

摘要

一、研究背景 皮肤组织的正常代谢和创面愈合的有序过程是细胞和细胞外基质之间相互影响的结果。糖尿病状态下源于糖代谢紊乱的基质糖基化改变使细胞所处微环境异常，可能是修复细胞生物学行为变化的重要原因。 二、研究目的 阐述糖尿病皮肤组织和溃疡创面中细胞增殖凋亡状态；通过体外建立糖基化ECM模型模拟细胞的生存环境，了解皮肤微环境改变与细胞增殖凋亡调控之间的相关性；明确糖基化基质对细胞增殖凋亡事件的调控效应和作用环节，从而在细胞增殖凋亡调控环节上对糖尿病皮肤“隐性损害”及创面修复延迟的机制进行初步探讨三、研究内容： 1．糖尿病皮肤组织及溃疡创面细胞的增殖凋亡状态 观察正常人和糖尿病患者皮肤和创面组织的组织学表现；检测皮肤和创面组织PCNA、cyclinBl和凋亡细胞表达；测定皮肤组织中p53、Bcl-2和Bax的含量。 2．糖基化基质体外模型的建立及其对人皮肤成纤维细胞增殖凋亡的影响组织标本检测AGE分布；糖基化基质体外模型的建立和鉴定及其对FB存活率，细胞周期和凋亡的影响。 3．糖基化基质影响人皮肤成纤维细胞增殖凋亡的机制研究组织标本检测RAGE、p-ERKl／2和p-p38的表达；根据接种于对照或糖基化基质，是否用RAGE抗体或U0126或SB203580干预，分成不同的组别，测定细胞存活率，细胞周期和凋亡；细胞p-ERKl／2、p-p38、p53、Bax、Bcl-2的蛋白表达以及cyclinDl、cyclinBl、P53和P21的mRNA表达水平四、研究结果和结论： 1. 无外源性损伤时，糖尿病皮肤组织中凋亡细胞增加，相关的凋亡调控蛋白表达异常；糖尿病溃疡创面中修复细胞的增殖能力明显减弱和凋亡细胞的增加，可能是糖尿病创面肉芽形成障碍的原因之一。 2. 糖尿病皮肤组织中糖基化ECM蓄积，真皮细胞表面RAGE表达增强，糖基化基质经RAGE介导上调p53和p21基因表达影响细胞周期的有序运行，调控Bcl-2家族蛋白的表达促进细胞凋亡；皮肤组织中糖基化ECM蓄积是细胞功能改变的重要环境介质，RAGE介导的相关通路及其对增殖凋亡过程的影响是导致糖尿病皮肤“隐性损害”及创面修复延迟的机制之一。 3.糖尿病皮肤组织中p-p38表达水平增高，糖基化基质经p38通路介导上调p53基因表达，调控Bcl-2家族蛋白影响细胞增殖凋亡平衡，p38的激活及其产生的效应部分是由RAGE受体介导的。 4、糖尿病皮肤组织中p-ERK1/2表达水平增高，但ERK1/2通路未参与糖基化基质对FB增殖凋亡的影响。

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摘要

前言

第一部分糖尿病皮肤组织及溃疡创面细胞的增殖凋亡状态

第二部分糖基化细胞外基质体外模型的建立及其对人皮肤成纤维细胞增殖凋亡的影响

第三部分糖基化细胞基质影响人皮肤成纤维细胞增殖凋亡的机制研究

结论

参考文献

附：综述 晚期糖基化终产物受体与创伤修复

致谢

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