鸡传染性支气管炎病毒0801株的分离鉴定及S1基因序列分析

摘要

鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis，IB）是由冠状病毒科（Coronaviridae）传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）引起的一种急性高度接触性传染病。该病主要侵害鸡的呼吸系统、消化系统和泌尿生殖系统，可以引起雏鸡死亡，蛋鸡产蛋量及蛋品质下降，给养禽业造成巨大的经济损失。IBV突出的特点是血清型众多，且新的血清型和变异株不断出现，给本病的防治带来很大困难，免疫失败现象时有发生，所以从现地分离株中筛选疫苗株对控制IB非常重要。IBV的基因组为不分节段的单股正链RNA，编码三种主要结构蛋白（纤突蛋白S，膜蛋白M和核衣壳蛋白N）及其它蛋白。IBV的S蛋白可以裂解成S1和S2两个亚单位。S1是重要的免疫原蛋白，能诱导产生中和抗体和血凝抑制抗体，并且与病毒的组织嗜性有关。S1基因的点突变、插入、缺失或者重组是IBV产生新血清型，亚型和变异株的主要原因，对于S1基因的变异与病毒的抗原性的改变之间是否存在一致性尚不清楚。故对S1基因深入研究具有重要意义。从分子水平研究S1基因的分子结构和遗传进化特点，可以为IB的防控提供可靠的理论依据。2008年1月，河北沧州某产蛋鸡场鸡群出现以呼吸道症状为主的疾病症候，并迅速波及全群，少数几只出现死亡，死亡率约0.5％。剖检发现鸡只肾脏肿大，有尿酸盐沉积，呈“花斑肾”样，其它脏器器官未见明显病变。已知该鸡群曾按正常程序进行接种过IBV H120疫苗。
　　 本研究收集患病鸡只肾脏、气管等组织，进行病毒分离培养。通过新城疫病毒干扰试验、致鸡胚矮小化试验、血凝特性试验、动物回归试验以及分子生物学试验等证实分离到的0801株为一株传染性支气管炎病毒。交叉中和实验结果显示，0801株与Ma5、W93、H120、M41、H52株的关系系数R分别为80.7％、67.7％、73.3％、54.0％、70.8％。依据判定标准（R>80％，两毒株为同一亚型；25％

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