肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究

摘要

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，在我国，肝癌的死亡率占居民恶性肿瘤死亡率的第二位，严重影响了人们的健康。迄今为止，化学药物疗法仍是治疗肝癌的主要方法之一，抗癌药物肝靶向传输系统为肝癌的药物治疗提供了一种新的思路和给药方法。 大蒜素(allitrid)为百合科植物大蒜(allium sativum L．)鳞茎中所含的一种抗癌活性成分，化学名称为二烯丙基三硫化物(diallyltrisulfide，DATS)。大蒜素有独特的药理活性，其抗癌、防癌作用已被国内外大量实验研究结果证实。它对肝癌、胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、白血病等多种肿瘤均有明显抑制作用。目前临床应用的大蒜素制剂主要有胶囊剂和注射剂，但普遍存在生物半衰期短(t<,1/2>=2.32h)和一定毒副作用等缺点，而且持续治疗易产生耐药性，理化性质不稳定。 采用现代靶向制剂技术，选择以DATS为模型药物，以生物可降解型高分子材料聚氰基丙烯酸正丁酯为载体材料研制肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒，探索肝癌治疗药物肝靶向给药的新思路、新方法和新技术，具有很高的科学技术价值和实践应用价值。主要研究结果如下： 1．利用低温超速离心法对纳米粒与游离药物进行分离，采用HPLC法测定纳米粒中大蒜素的含量和包封率。 2．以大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的形态、包封率等为指标，通过单因素试验考察了表面活性剂和稳定剂的种类、搅拌时间、搅拌速度、制备温度、pH、吸附时间等因素对大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒性质的影响，筛选出了影响大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒质量指标的主要因素。并在此基础上，以DATS、Dxtran-70、PluronicF-68、α-BCA及NaHSO<,3>用量、pH值为考察因素，以大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒形态、粒径分布、包封率和载药量等为评价指标，采用均匀设计对处方和制备工艺进行了优化。优化后得到的大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在透射电镜下观察分散性好、圆整、均匀而不粘连，粒径范围在11.7～146.8nm之间，平均粒径为116.9nm，包封率为90.92％，载药量为18.18％。优化的制备工艺简单，有利于大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的稳定性，包封率高，粒径及电荷符合肝靶向要求，达到了本课题的预期目标。 3．大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的体外释药符合双相动力学方程，方程为100-Q=0.7818e<'-3.3231t>+0.6322e<'-0.03873t>，快速释药半衰期t<,1/2a>为0.42h，慢速释药半衰期t<,1/2β>为5.32h，表明给药后到达肝部位可快速释放药物，达到较高药物浓度发挥治疗作用；慢速释药不断补充靶部位能维持较长时间而发挥治疗作用，这一特点正好符合抗癌药物化疗所需，对照注射液无此特点。 4．大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒稳定性结果显示：纳米粒在加热条件下不稳定；在25℃条件下贮存2个月，包封率显著下降，粒径增大，而在4℃条件下贮存4个月，包封率略有下降，粒径微有增大，稳定性较好，说明纳米粒需在冷藏条件下保存。采用<'60>Co辐射灭菌，既保证了产品的卫生要求，又保证了产品的稳定性。 5．家兔药动学实验表明：DATS注射液和大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒静脉给药后，均符合双室模型特征。与注射液组相比，大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在家兔体内的消除半衰期显著延长，t<,1/2>从1.66h延长至5.32h，AUC显著增高，清除率降低，可显著延长药物在体内的存留时间，从而延长药物与肝脏组织的接触时间，可显著提高药物疗效。 6．选用小鼠为动物模型，以DATS注射液为对照，研究了大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的体内分布过程，并进行了靶向性评价。结果表明大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒较DATS注射液对肝脏靶向性显著提高，肝脏中的相对摄取率r<,e>为7.361；肝脏内峰浓度提高到3.38倍；肝脏总靶向效率T<,e>从5.17％提高至40.33％，表明纳米粒对肝脏有显著靶向性，达到了本课题设计要求。 以大蒜素为模型药物，以聚氰基丙烯酸正丁酯为载体材料，制成大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒目前国内外尚未见报道。该研究对探索肝脏治疗药物实现肝靶向给药具有很高的科学技术价值和临床应用前景。

目录

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

符号说明

前言

第一部分肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒含量及包封率测定方法

第二部分肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备

第三部分肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的理化性质与体外释药动力学稳定性研究

第四部分肝靶向性大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒家兔体内动力学和小鼠体内组织分布学研究

全文结论

参考文献

致谢

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大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备工艺研究

大蒜素纳米粒的制备及其家兔体内药动学和小鼠体内分布研究