耐喹诺酮类药物乳酸菌的特性与其主动外排系统的相关性

摘要

本试验以分离自内蒙古锡林郭勒牧区酸马奶中的14株乳酸菌为研究对象，采用试管二倍稀释法测定2种喹诺酮类药物对试验菌株的最小抑菌浓度（MIC），结果显示14株乳酸菌对诺氟沙星和环丙沙星呈现出不同程度的耐药，耐药率高达100％，其中7株试验菌株对两种喹诺酮类药物的MIC值均大于512μg/mL。
　　利用质子泵抑制剂利血平，采用荧光分光光度法检测试验菌株和对照菌株对环丙沙星的摄取情况，结果表明：试验菌株ZHZ18、ZHZ28、ZNN3、ZNN4主动外排作用明显，且能量抑制剂利血平可以抑制其主动外排。
　　对4株主动外排作用明显的试验菌株进行形态学鉴定、生理生化鉴定和16S rRNA同源性分析，结果显示：菌株ZHZ18、ZHZ28为Enterococcus durans（坚强肠球菌），菌株ZNN3、ZNN4为Enterococcus faecium（屎肠球菌）。
　　试验菌株ZHZ18和ZHZ28经PCR扩增得到一段编码ABC主动转运蛋白的染色体基因efrB，该基因碱基序列与标准菌株E. faecalis的efrB碱基序列同源性为76%。其翻译的氨基酸序列与GenBank中注册号为WP_053109251的坚强肠球菌ATP转运蛋白同源性为100%，与标准菌株E. faecalis的氨基酸序列有29处不同，占所测序列的12.7%，该基因翻译的蛋白质可能是介导试验菌株对喹诺酮类耐药的主动外排蛋白之一。

目录

1 引言

1.1 酸马奶概述

1.2 乳酸菌概述

1.3 乳酸菌耐药性现状

1.4 喹诺酮类药物

1.5 细菌耐喹诺酮类药物研究进展

1.6 研究意义与目的

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果与分析

3.1 试验菌株的菌落特征和细胞形态

3.2 药敏试验最适培养基的选择

3.3 试验菌株的耐药表型

3.4 试验菌株主动外排作用试验结果

3.5 耐药菌株的鉴定

3.6 主动外排蛋白emeA、efrA和efrB基因扩增结果

4 讨论

4.1 乳酸菌药敏试验与CLSI解释标准

4.2 乳酸菌耐药性测定方法

4.3 乳酸菌耐药性

5 结论

致谢

参考文献

附录

作 者 简 介