超声波处理对文心兰（Oncidium）离体形态发生及其生理生化影响的研究

摘要

文心兰(Oncidium),属兰科文心兰属。植株轻巧,花茎分枝性良好、轻盈下垂,花朵奇异可爱,花姿秀美,形似翩翩起舞的女孩,是一种非常美丽而极具观赏价值的兰花,近年来倍受国际花卉市场的青睐,成为洋兰类的新宠之一。超声波对植物生长发育的影响已成为植物学领域的重要课题之一,研究表明较低强度和频率的超声波作用于某些植物可以增强其代谢过程,增加细胞膜的透性和选择性,有利于DNA的合成和细胞周期的同步化。针对目前国内外市场对文心兰的大量需求及生产能力的不足,本文以文心兰原球茎及无菌苗为材料,通过不同频率不同时间的超声波处理,研究其对文心兰原球茎及无菌苗形态和生理生化特性的影响,对于促进丈心兰生产具有重要意义。实验结果如下： 1.组培用罐头瓶比三角瓶适宜作为玻璃介质用于超声波促进原球茎增殖,增殖率提高24.2％；25kHz超声波处理组原球茎平均增殖率比40kHz超声波处理组高23.4％,其中25kHz超声波处理3min组促进增殖效果较佳,原球茎平均增殖率比对照组高49.5％；25kHz超声波处理组原球茎平均分化芽数比443kHz超声波处理组高28.3％,其中25kHz超声波处理6min组促进分化效果较佳,平均分化芽数比对照组高98.8％：25kHz超声波处理组无菌苗平均根长与平均根数比40kHz超声波处理组高10.1％和13.6％,其中25kHz超声波处理3min组促进生根效果较佳,无菌苗平均根长与平均根数比对照组高75.0％和37.5％。 2.超声波对文心兰的SOD、POD、CAT三种保护酶活力的影响十分显著,文心兰SOD、POD、CAT三种保护酶活性在增殖阶段最大峰值出现于25kHz超声波处理3min组：分化阶段最大峰值出现于25kHz超声波处理6min;生根阶段最大峰值出现于25kHz超声波处理3min,与超声波对文心兰原球茎增殖、分化及生根的影响一致。文心兰保护酶活性诱导同时受到包括超声波、培养基等在内的各种环境因素、植物体自身生理状态以及其他因素的综合影响。 3.文心兰MDA、可溶性糖、可溶性蛋白质含量同时受到包括超声波、培养基等在内的各种环境因素以及植物体自身生理状态及其他因素的综合影响。MDA含量最低值以及可溶性糖和可溶性蛋白质含量在增殖、分化、生根阶段均分别出现于超声波处理3min、6min和3min组,这与超声波对保护酶活性影响以及对形态指标的影响一致。超声波处理使得MDA含量维持在一个较低水平。分化和生根过程中可溶性蛋白质含量的变化趋势和可溶性糖相反。 4.电泳结果显示25kHz超声波处理3min和4min组比其他超声波处理组具有更高的蛋白含量。组织学特征研究显示超声波处理组出现淀粉粒减少、细胞核可见的薄壁细胞数量增多、部分薄壁细胞的细胞壁增厚的现象,与超声波刺激文心兰增殖分化的作用相关,过长时间超声波处理超过细胞的耐受极限,会对细胞造成器质性的损伤。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一部分文献综述

1文心兰组织培养的研究现状

1.1文心兰生物学特征

1.2文心兰生理特性

1.3常规繁殖方式

1.4文心兰组织培养

1.5无菌条件下的播种繁殖

1.6文心兰离体再生途径

1.7文心兰基因工程的研究

2超声波的研究现状

2.1超声波的生物效应

2.2超声波对细胞的作用

2.3超声波对酶的作用

2.4超声波对植物的作用

2.5对植物病毒的作用

2.6在基因工程中的应用

2.7超声波萃取

3本论文研究的目的和意义

第二部分试验研究

第一章超声波对文心兰原球茎增殖、分化、无菌苗生根的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

附图

第二章超声波处理对文心兰原球茎和无菌苗保护酶活性的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第三章超声波处理对文心兰MDA、可溶性糖、可溶性蛋白质含量的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第四章超声波处理后文心兰原球茎蛋白质分析和组织学特征研究

1材料和方法

2结果与分析

3讨论

附图

全文结论

参考文献

致谢