新型免疫活性肽的筛选及其免疫活性的研究

摘要

乳一直以来被人们认为是一种营养蛋白,它为新生儿或成年人提供极为丰富的营养和均衡的氨基酸.另外它含有α-LA、β-LG、酪蛋白、免疫球蛋白、乳铁蛋白和少量的乳清蛋白等生物活性物质.乳在体内经胃肠道消化水解还可以产生多种生物活性肽,这些活性肽,以无活性的状态存在于乳蛋白前体物中.乳中的主要蛋白-酪蛋白就可产生多种生理功能的活性肽.其中免疫活性肽尤为重要,它可以刺激机体增强免疫功能,对机体具有保护功能,还可以促进婴幼儿免疫系统的分化和成熟,以帮助婴幼儿以不成熟的免疫系统抵抗各种外来病菌、毒素而健康地生长发育.免疫活性肽能够增强机体免疫力,刺激机体淋巴细胞的增殖,增强巨嗜细胞的吞噬功能,提高机体抵御外界病原物质感染的能力,降低机体发病率.该研究在45℃条件下,用胰蛋白酶对酪蛋白水解2小时,然后通过等电点沉淀、乙醇沉淀和葡聚糖凝胶层析等方法,从酪蛋白中分离纯化出电泳纯的免疫活性肽,通过MTT比色法测定了其免疫促进作用,用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析了其纯度,用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳检测了其等电点.结果表明,通过:等电点沉淀——两次乙醇沉淀——Sephadex G-15柱层析分离得到电泳纯度的免疫活性肽.MTT比色法显示该肽具有显著刺激淋巴细胞增殖的作用.此外,在该研究的基础上,还可进一步扩大实验,寻找更好的、更有效的适合大量制备免疫活性肽的分离纯化方法,为免疫活性肽实现工业化生产奠定基础.

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

1.1引言

1.2生物活性肽研究的现状

1.3免疫活性肽研究的动态及趋势

1.4开展此课题的依据

1.5开展此课题的意义

第二章材料和方法

2.1酶解条件的确定

2.2免疫活性肽的分离纯化

2.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

2.4免疫活性测定

2.5等电聚焦

第三章结果

3.1酶解条件的确定

3.2免疫活性肽的分离纯化

3.3纯品验证

3.4免疫活性测定结果

3.5等电点的确定

第四章分析与讨论

第五章结论

参考文献

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致谢