伤寒沙门氏菌致病仔猪胃肠道组织中蛋白酶激活受体2的定位研究

摘要

本试验通过H．E．染色观察腹泻仔猪胃肠道病理变化，和免疫组织化学染色观察断奶后PAR．2在正常与腹泻仔猪体内的分布及量的变化规律，研究PAR-2与断奶仔猪腹泻之间的关系。 方法：取断奶仔猪的胃肠道，按照组织学特性分别分组为：胃贲门区、胃底区、胃幽门区，十二指肠、空肠、回肠、结肠、盲肠段。进行多聚甲醛固定，常规包埋，4岬切片。同时，无菌取肠道内容物作微生物学病原菌的分离鉴定。健康仔猪组织作对照，运用免疫组织化学原理，各组织石蜡切片用山羊抗人PAR-2多克隆抗体作一抗，进行SABC法染色，观察组织内PAR-2定位部位，并同步进行H．E．染色，镜检拍照比较分析。 结果表明： 1．腹泻仔猪部分组织有干酪样病变，全身浆膜有不同程度的出血点，胃肠道内容物稀薄，粘膜表面覆着大量粘液，肠壁厚薄不均，弹力下降；培养分离鉴定致病菌为伤寒沙门氏菌； 2．HE染色观察，病理组织学变化主要表现为粘膜上皮细胞脱落变性，肠壁平滑肌变薄，固有层内中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等浸润、水肿，粘膜下层淋巴小结增生，分别表现出不同的炎症程度。 3．运用免疫组织化学分析，发现仔猪胃肠道广泛的表达PAR-2，特别在粘膜上皮细胞的顶端，腺细胞的基底部，血管上皮细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞等，所设对照组均未见阳性反应；并且，PAR-2在腹泻仔猪比正常仔猪的表达增加，特别是炎性细胞的强表达。 综上所述，PAR-2在胃肠道广泛存在，小肠表达量略低；同时发病初期炎症细胞强表达，提示PAR-2在健康和疾病中起双重作用，表明PAR-2激动剂和拮抗剂，在应用到各种疾病的治疗中会有很大帮助。

目录

论文说明：英文缩写词汇表(Abbreviation)

声明

1文献综述

1.1蛋白酶激活受体概述

1.2蛋白酶激活受体2

1.2.1概述PAR-2结构

1.2.2 PAR-2的分布

1.2.3 PAR-2的生物学意义

1.3仔猪的断奶腹泻

1.3.1早期断奶

1.3.2仔猪腹泻原因

1.3.3仔猪腹泻的治疗

1.4免疫组织化学

1.5研究目的意义

2材料与方法

2.1实验动物

2.2主要试剂

2.3主要仪器设备

2.4材料的采集及处理方法

2.5断奶仔猪腹泻致病菌的分离鉴定

2.5.1细菌的分离

2.5.2生化试验

2.5.3动物致病性试验

2.6断奶腹泻仔猪胃肠道的病理组织学观察

2.7断奶仔猪胃肠道PAR-2的免疫组织化学检测

2.8染色对照

3结果

3.1断奶腹泻仔猪致病菌的分离结果

3.1.1临床症状及剖检变化

3.1.2培养及形态染色特征

3.1.3各类菌株的生化特征

3.1.4致病性试验结果

3.2断奶腹泻仔猪胃肠道的病理组织学观察结果

3.3断奶仔猪胃肠道PAR-2的免疫组织化学检测结果

4讨论

4.1断奶仔猪腹泻的病原菌

4.2肠道菌与机体的关系

4.3断奶仔猪与腹泻仔猪组织结构变化

4.4 PAR-2在仔猪胃肠道的免疫组织化学

4.5抗原修复方法对结果的影响

5结论

参考文献

致谢

附录