国产探针荧光原位杂交在膀胱癌诊断中的应用

摘要

背景与目的： 膀胱癌是世界十大恶性肿瘤之一，也是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，但其早期诊断比较困难。膀胱移行细胞癌(Bladder Transitional Cell Carcinoma，BTCC)是其中最为常见的病理类型，其显著特点是具有多病灶和高复发率。因此膀胱癌病人术后监测尤为重要。传统的膀胱癌的诊断及术后监测手段主要有尿脱落细胞分析、膀胱镜检查等。这些方法有侵入性，且缺乏敏感性和特异性。随着分子生物学技术的发展，近年出现了一些检测膀胱癌的新方法，和尿脱落细胞分析相比有较高的诊断敏感性，但可受血尿、尿路感染、膀胱灌注治疗的影响而出现假阳性结果。因此，仍需一种更为有效、简便、安全的方法来诊断及监测膀胱尿路上皮癌复发。Sandberg研究认为，膀胱癌易发生非随机的染色体改变，包括结构畸变和染色体数目异常。Sokolova等和Halling等根据以往研究结果，研发了四色FISH(UroVysion)试剂盒，用于尿路上皮癌的诊断和术后监测。国外的研究显示其诊断敏感性高于尿脱落细胞学，特异性与尿脱落细胞学相当。但由于费用和技术的问题，FISH在我国一直未得到广泛应用，尤其是在膀胱癌诊断应用中。最近，国内金菩嘉公司研制出膀胱癌DNAFISH探针，降低了FISH膀胱癌诊断费用，但在我国尚无与此试剂盒相关的研究结果报告。本研究使用国内金菩嘉公司膀胱癌DNA FISH探针，采用FISH技术检测9p21区带及17、7、3号染色体的畸变情况，探讨使用国产膀胱癌DNA FISH探针的FISH应用于中国人膀胱癌诊断的可行性。 材料与方法： 20例尿液标本来自于2007年1月至2008年5月中山大学附属第三医院泌尿外科手术病例，在未经治疗前留取。所有病例均经病理诊断为膀胱癌。另取20例正常人尿液标本作为对照。使用国内金菩嘉公司膀胱癌DNA FISH探针，采用FISH技术检测9p21区带及17、7、3号染色体的畸变情况，并对结果进行相应的统计学分析。 结果： 在正常人对照组中，各探针所标记的染色体均未发现有达到国外诊断标准的畸变。在总共20例膀胱癌病人组中，4个染色体均显示较高的畸变率。9p21区带畸变率为75％，17号染色体畸变率为60％，7号和3号染色体畸变率均为70％。根据国外FISH探针诊断膀胱癌判定标准，国产膀胱癌9p21及17、7、3号染色体探针组合诊断膀胱癌的敏感性为90％，特异性为100％。9p21以及17、7和3号染色体畸变率与病理分期、分级均有显著相关性(P<0.01)。 结论： 1.膀胱癌FISH检查有着较高的敏感性和特异性，虽然在目前尚不能完全取代膀胱镜检查诊断膀胱癌的金标准，但在一些可疑病例中，仍不失为一种较好的辅助检查方法。 2.本研究中，运用金菩嘉公司国产膀胱癌DNA FISH探针诊断膀胱癌具有较高的敏感性及特异性，但能否用于中国人膀胱尿路上皮癌的诊断，尚需要增大样本量，并研究更多的染色体在膀胱尿路上皮癌患者、非尿路上皮癌尿路疾病患者和正常人尿脱落细胞中的畸变情况，以制定适当的阳性判断标准及寻找适于中国人的探针组合。

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