肿瘤坏死因子α、吡格列酮对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响

摘要

目的:观察吡格列酮(P10)和肿瘤坏死因子α(TNF-Q)对3T3-L1细胞脂联素mRNA表达和脂联素分泌的影响。 方法:以不同浓度PIO和TNF-α于不同时间段处理3T3-L1细胞，采用RT-PCR技术检测上述各个条件下脂联素mRNA的表达水平；用ELISA的方法检测培养液中脂联素浓度。 结果:(1)脂联素mRNA和蛋白在3T3-L1前体脂肪细胞中不表达：在脂肪细胞分化过程中的表达呈逐渐上升趋势。(2)以0．1ng／ml、1ng／ml、10ng／ml、100ng／ml的TNF-Q刺激成熟脂肪细胞48h后，末三种浓度的TNF-α使脂联素mRNA表达量分别减少12．64％、29．31％、68．65％，呈剂量依赖性。以100ng／mlTNF—α处理分化过程中的3T3一L1脂肪细胞，第2天无脂联素mRNA的表达，与对照组相比，第4、6、8天表达量分别减少3．40％、10．54％、17．60％，呈时间依赖性。予100ng／mlTNF-α干预成熟脂肪细胞，脂联素mRNA在第24、48、72h分别减少12．38％、63．44％、64．33％，呈时间依赖性。在成熟脂肪细胞，TNF—Q对脂联素蛋白分泌呈剂量依赖性抑制。(3)以O．1umol／L、1umol／L、10um01／L、100um01／L的PlO分别干预成熟脂肪细胞48h后，末两种浓度的PIO分别使脂联素mRNA相应上升了4．40％、18．58％，呈剂量依赖性。予100umol／LP10作用3T3-L1前体脂肪细胞，第2、4、6天均无脂联素mRNA表达，在第8天开始出现。用100umol／LPIO处理分化过程中的3T3-L1脂肪细胞，第2天无脂联素mRNA表达，在第4、6、8天的表达量分别增加¨．5l％、26．75％、41．05％，呈时间依赖性。以100umol／LPIO刺激成熟脂肪细胞，脂联素mRNA表达量在第12、24、48、72h分别增加17．8％、27．98％、55．73％、58．66％，呈时间依赖性。在分化和成熟脂肪细胞中，PIO分别以时间依赖和时间剂量依赖性促进脂联素的分泌。(4)100umol／LPIO和1.00ng／mlTNF-a共同作用成熟脂肪细胞48h后，与单用100ng／mlTNF—α刺激成熟脂肪细胞48h比较，脂联素mRNA表达量增加15．8％。 结论:脂联素基因及蛋白的表达随3T3-L1细胞分化时间的延长而逐渐增加。TNF-α以时间剂量依赖性抑制成熟脂肪细胞脂联素mRNA表达，以时间依赖性抑制分化过程中的3T3一U细胞脂联素mRNA表达；对脂联素蛋白分泌呈剂量依赖性抑制。PIO能促进或激活前体脂肪细胞分化和脂联素的表达；在3T3-L1细胞分化过程中，PIO以时间依赖方式促进脂联素mRNA的表达和蛋白的分泌；在成熟脂肪细胞中，PlO以时间剂量依赖的方式促进脂联素的表达和蛋白的分泌。P10能改善TNF—Q在3T3-L1成熟脂肪细胞对脂联素的抑制。

目录

英文缩写词表

摘要

1.前言

2材料与方法

3.结果

4.讨论

5.结论

参考文献

附录一

附录二

附录三致谢

综述脂联素的研究进展