液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中福沙匹坦和阿瑞匹坦

摘要

背景:福沙匹坦是阿瑞匹坦的前体药物，能够在体内迅速发生水解，代谢生成阿瑞匹坦。阿瑞匹坦是一种选择性的P物质/NK-1受体抑制剂，从而达到止吐的疗效，临床上一般用于治疗由于化疗引起的恶心及呕吐。文献中报道的生物分析方法缺少对福沙匹坦在人血浆中稳定性的考察。
　　目的:建立一个快速的、选择性高的、解决福沙匹坦测定时稳定性问题的液相色谱-串联质谱法，并将验证后方法应用于福沙匹坦和阿瑞匹坦在中国健康成人体内的药物代谢动力学研究，为临床安全、合理用药提供参考依据。
　　方法:以d4-福沙匹坦和d4-阿瑞匹坦作为内标，血浆样品经乙腈沉淀蛋白，以甲醇-10mmol·mL-1醋酸铵水溶液(含0.1mmol·mL-1EDTA)为流动相梯度洗脱，色谱柱为Cortex C18+(50×2.1mm，2.7μm)，色谱运行时间为4min。质谱检测采用电喷雾电离源，负离子方式进行多重反应检测(MRM)。定量分析的离子反应分别为m/z613.1→78.9（福沙匹坦）和m/z617.0→78.9（d4-福沙匹坦，内标），m/z533.2→275.1（阿瑞匹坦）和m/z537.2→279.1（d4-阿瑞匹坦，内标）。发现放置于室温、4℃和-20℃下，福沙匹坦在血浆中不稳定。未经碱性缓冲液处理的福沙匹坦血浆样品于室温放置1h降解约40％，于4℃放置1h降解约40％，于-20℃放置1h降解约17％。为改善福沙匹坦在人血浆中的稳定性，通过考察各个条件下福沙匹坦人血浆中的降解情况，尝试不同条件，使得其在实验情况下能够稳定。
　　结果:测定人血浆中福沙匹坦标准曲线的线性范围为15.0～6000ng·mL-1，阿瑞匹坦的线性范围为10.0～4000ng·mL-1。各待测物的日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析相关要求。
　　考察了未经任何处理的福沙匹坦全血样品和血浆样品于室温、4℃和-20℃下放置时间与降解情况的关系。
　　通过在人血浆样品中加入500mmol·mL-1醋酸铵水溶液（以氨水调节其pH至9.0）后，人血浆样品室温放置6h，预处理后4℃放置24h，经历三次冷冻-解冻循环，-20℃和-70℃储存93天，结果表明福沙匹坦和阿瑞匹坦的人血浆样品在上述储存条件下均稳定。
　　结论:本实验建立了一个快速的、选择性高的、解决福沙匹坦测定时稳定性问题的LC-MS/MS法，进行了完整的方法学验证并将确证后方法应用于福沙匹坦和阿瑞匹坦在中国健康成人体内的药物代谢动力学研究。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词简表(Abbreviations)

第一章 前言

1．2 阿瑞匹坦和福沙匹坦的药理作用及药动学性质

1．3 福沙匹坦和阿瑞匹坦的生物样品分析方法

1．4 实验目的和研究计划

第二章 生物样品分析方法的建立和确证

2．1 材料和方法

2．1．2 仪器和设备

2．2 分析方法的建立

2．2．1 质谱条件优化

2．2．2 色谱条件优化

2．2．3 内标的选择

2．2．4 溶液的配制

2．2．5 预处理优化

2．3 稳定性考察

2．4 分析方法验证

2．4．1 方法选择性

2．4．2 线性范围和定量下限

2．4．3 方法的精密度和准确度

2．4．4 血浆样品提取回收率

2．4．5 基质效应考察

2．4．6 稀释试验

2．4．7 残留

2．4．8 同位素效应的考察

2．5 结果与讨论

第三章 福沙匹坦双葡甲胺注射剂人体药动学研究

3．1 实验目的

3．2 临床试验部分

3．2．1 试验设计

3．2．2 志愿者选择

3．2．3 受试药品

3．2．4 血样采集

3．3 生物样品分析及数据采集

3．3．1 血浆样品分析

3．3．2 数据处理及统计

3．3．3 已知样品再分析

3．4 临床试验结果及评价

3．4．1 志愿者平均血药浓度-时间曲线图

3．4．2 药动学数据及主要药动学参数

3．5 讨论

第四章 结论

参考文献

个人简历

硕士期间发表的论文和专利

附录