超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆利伐沙班浓度

摘要

目的 建立测定人血浆中利伐沙班浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法.方法 以乙腈沉淀蛋白处理血浆样品,d4-利伐沙班为内标.色谱柱为Thermo Hypersil Gold C18(2.1 mm×100 mm,1.9μm).流动相为乙腈-水(含0.1％甲酸和5 mmol·L-1醋酸铵),梯度洗脱.质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式检测,扫描方式为多反应离子监测.用于定量分析的离子反应分别为m/z 436.1→m/z 145.1(利伐沙班)和m/z 440.2→m/z 145.0(d4-利伐沙班).结果 利伐沙班在1～500 ng·mL-1范围内线性良好,定量下限为1 ng·mL-1,日内日间精密度均<8％,绝对回收率90.09％～95.23％,基质效应93.50％～100.09％.血浆样品室温(20℃)放置4 h,处理后(4℃)放置24 h,冻存(-80℃)50 d以及反复冻融3次稳定性良好,样品浓度均无显著变化.结论 该分析方法灵敏、准确,样品处理简便、快速,能为该药的药物相互作用评价和个体化用药实践提供方法学参考.