重组人血管内皮细胞增殖抑制因子(Endostatin)的研制及其抗肿瘤作用研究

摘要

该研究拟建立获得可溶性有活性的Endostatin蛋白的中试生产工艺,以获得足够量的Endostatin蛋白,以便能研究Endostatin蛋白的抗肿瘤活性和机制,为进一步开发Endostain蛋白为抗肿瘤新药奠定基础.该研究主要开展了如下研究工作:一、重组人融合Endostatin工程菌的研制;二、重组人融合Endostatin的表达、复性和纯化;三、重组人Endostatin 生物活性研究.通过该课题研究:1.构建了高表达重组人融合Endostatin的工程菌株.2.建立了中试规模高密度发酵工艺条件.3.建立了在Chelating Sepherase FF填料表面原位获得高比值可溶性重组人Endostatin的复性方法,其可溶性复性率达到国内外最高水平.4.采用His亲和、离子交换和分子排阻层析,取得高纯度的重组人Endostatin.5.对重组人Endostatin生物活性进行研究.证实用上述工艺条件制备的重组人Endostatin具有抑制血管内皮细 胞增殖、抑制鸡胚血管生成和抗肿瘤作用.

目录

前言

第一部分：重组人融合Endostatin工程菌的研制

实验材料

研究方案和实验

实验结果

第一部分小结

第二部分：重组人融合Endostatin的表达、复性和纯化

实验材料

研究方案和实验方法

实验结果

第二部分小结

第三部分：重组人Endostatin生物活性研究

实验材料

研究方案与实验方法

实验结果

第三部分小结

讨论

结论

参考文献

综述

致谢