SSH法检测结肠正常粘膜、腺瘤和腺癌中差异表达的基因

摘要

目的:该研究采用同一患者结直肠正常粘膜、腺瘤和腺癌组织分别作为检测(Tester)和驱赶(Driver)cDNA进行两两比较.分别获取同一患者结肠远端粘膜、腺瘤和腺癌组织的cDNA,运用SSH法筛选差异表达的基因,并构建三个相应的差减文库,即以腺瘤为检测cDNA、 远端粘膜为驱赶cDNA的差减A-N文库;以腺癌为检测cDNA、远端粘膜为驱赶cDNA的差减T-N文库和以腺癌为检测cDNA、腺瘤为驱赶cDNA的差减T-A文库.结论:1.通过SSH法建立了三个差减杂交文库,文库差异表达片段在3~4×10<'2>间,核苷酸序列分析和GenBank同源搜索明 确了部分基因片段的意义,也发现还有许多未知序列的存在.2.差减效率分析、文库筛选、测序与序列的同源查询、VirtualNorthernBlot和RNADotBlot验证以及对已知基因的分析, 都证实了SSH法的敏感、有效,是理想的差减方法.3.对肿瘤相关基因进行综合分析的必要 性,提出肿瘤发生中分子间相互作用模块的存在及意义.4.进一步的工作包括对已知基因的深入分析和对未知基因的探索.

目录

一、中文摘要

二、英文摘要

(一)缩略语

(二)前言

(三)材料

(四)方法

(五)结果

(六)讨论

(七)结论

(八)参考文献

四、综述

(一)抑制性差减杂交方法介绍

(二)血清检测在结直肠癌诊断中的应用

五、在读期间的成果

六、致谢