用加压CO从乙醇-水溶液中沉淀蛋白质的研究

摘要

首先,建立了一套用于SAS沉淀分离的实验装置,以牛奶中蛋白质为模拟对象,考察了在混合溶剂中超(近)临界抗溶剂CO<,2>沉淀蛋白质时,助溶剂——乙醇对蛋白质沉淀的影响.第二,通过对乙醇-水混合溶剂中纤维素酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶等在超(近)临界CO<,2>中沉淀情况的考察和酶活变化的测定,表明不同的酶在实验条件下沉淀现象和酶活变化规律各异,并总结出含蛋白质(酶)混合物在乙醇-水溶液中进行超(近)临界CO<,2>处理的三个前提条件,确定了超(近)临界CO<,2>处理纤维素酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶等的温度、CO<,2>压力、乙醇浓度的操作范围.第三,通过对牛奶、纤维素酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶等在混合溶剂中进行超(近)临界CO<,2>沉淀的研究,得到了实验条件下上述溶液中总蛋白质的溶解度数据.第四,将实验体系近似为CO<,2>-C<,2>H<,5>-H<,2>O0三元系,并通过该三元系的相平衡研究,提出了可用于实际工程计算的MESV方程和相应的验算方法,得到了实验条件下可信的相平衡各组分组成数据.第五,首次建立了在超(近)临界条件下蛋白质在液相中的溶解度数学模型,并利用MESV方程的推算结果.最后,将首次提出的用加压CO<,2>从混合溶剂中沉淀蛋白质的新方法,运用于纤维素酶分离纯化和酸性蛋白酶、碱性蛋白酶去除杂蛋白过程.在分析纤维素酶的分离纯化时,引入了

目录

文摘

英文文摘

第一章文献综述

1.1.引言

1.2.生物分离过程的特点及其发展趋势

1.3.蛋白质的沉淀分离技术

1.3.1.盐析

1.3.2.有机溶剂沉淀法

1.3.3.等电点沉淀法

1.3.4.非离子型聚合物沉淀法

1.3.5.聚电解质沉淀法

1.3.6.金属离子沉淀法

1.3.7.超(近)临界流体抗溶剂沉淀法

1.4.超(近)临界流体是环境友好的可调性溶剂

1.5.超临界抗溶剂沉析技术

1.5.1.过程原理

1.5.2.操作方式和装置

1.5.3.影响因素

1.5.4.应用

1.5.5.存在的问题和发展的新趋势

1.6.研究思路

参考文献

第二章超(近)临界CO2沉淀牛奶中的蛋白质

2.1引言

2.2.实验材料

2.3.分析方法

2.4.实验装置和流程

25.实验条件选择与确定

2.6.结果与讨论

2.6.1.温度对蛋白质沉淀的影响

2.6.2.CO2压力对蛋白质沉淀的影响

2.6.3.乙醇浓度对蛋白质沉淀的影响

2.7.本章小结

参考文献

第三章若干种酶在超(近)临界CO2中的酶活变化特性

3.1.引言

3.2.实验材料和方法

3.2.1.实验材料

3.2.2.酶和酶活测定方法

3.2.3.实验装置和流程

3.2.4.实验条件选择与确定

3.3.结果与讨论

3.3.1.纤维素酶

3.3.2.α-淀粉酶

3.3.3.酸性蛋白酶

3.3.4.碱性蛋白酶

3.3.5.沉淀现象

3.4.本章小结

参考文献

第四章一种近似计算实验体系的相平衡组成方法的建立

4.1.引言

4.2.实验体系的相平衡研究

4.2.1.一个近似体系的提出

4.2.2.CO2-C2H5OH-H2O体系相平衡的计算

4.3.本章小结

参考文献

第五章超(近)临界CO2沉淀法分离纯化蛋白质及其溶解度的模型化

5.1.引言

5.2.超(近)临界流体条件下溶质在液相中的溶解度测定方法

5.2.1.目测法

5.2.2.重量法

5.2.3.溶解度的测定方法及其依据

5.3.装置及流程

5.4.结果与讨论

5.4.1.体系的相律分析

5.4.2.超(近)临界CO2条件下蛋白质在乙醇水溶液中的溶解度的模型化

5.4.3.纤维素酶分离条件的优化

5.4.4.酸性蛋白酶去除杂蛋白条件的优化

5.4.5.碱性蛋白酶去除杂蛋白条件的优化

5.5.本章小结

参考文献

第六章结论和建议

6.1.结论

6.2.建议

参考文献

致谢

作者简历