螺旋藻高产多糖种质与生产条件优化研究及分子机理初探

摘要

多糖不仅是所有生物有机体的重要组成成分,而且具有重要而独特的生物学活性.但由于生物活性多糖是一种次生代谢物质,它们在生物体中的含量一般都较低,往往达不到大规模产业化开发的要求,这是当前国内外在多糖类物质产业化研发过程中遇到的主要瓶颈问题之一.利用核技术及相关生物技术选育高产多糖的螺旋藻新品系,建立高产多糖的最佳生产模式,研究并阐明螺旋藻多糖的生物合成机制,对实现螺旋藻生物活性多糖的产业化与实际应用,具有重要的理论与实践意义.该论文就此开展了一些研究:1、螺旋藻多糖含量测定方法的建立与优化.2、不同基因型螺旋藻多糖合成特性比较及高产多糖出发品系的确立.3、高产多糖螺旋藻新品系的选育及其培养条件的优化.4、Sp-E(HPS)的分子鉴定及其高产多糖相关蛋白的初步研究.

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致谢

文献综述

1多糖的研究概述

2螺旋藻多糖生物活性的研究进展

2.1抗肿瘤活性

2.2抗病毒活性

2.3降血糖活性

2.4抗衰老活性

2.5抗辐射活性

2.6其他活性

3多糖生物合成的研究进展

3.1非藻类多糖生物合成的研究概况

3.2藻类多糖生物合成的研究进展

4螺旋藻遗传育种的研究进展

4.1自然分离与驯化技术

4.2原生质球(spheroplasts)的制备与再生

4.3基因工程育种

4.4诱变育种

第一章螺旋藻多糖含量测定方法的建立与优化

1材料与方法

1.1材料

1.2试剂

1.3标准曲线制作

1.4螺旋藻多糖含量的测定

2结果与分析

2.1测定条件的优化

2.2螺旋藻多糖含量的测定

3讨论

第二章不同基因型螺旋藻多糖合成特性比较及高产多糖出发品系的确立

1材料与方法

1.1材料

1.2试验培养液的配制

1.3培养条件与采收方法

1.4生长量的测定

1.5多糖含量的测定

1.6 DNA分子量标样

1.7 DNA提取液的配制

1.8 TE缓冲液的配制

1.9琼脂糖凝胶的制备

1.10螺旋藻总DNA提取

2结果与分析

2.1不同螺旋藻品系的多糖含量比较

2.2营养因子对Sp-E和Sp-D生长速率和多糖含量的影响

3讨论

第三章高产多糖螺旋藻新品系的选育及其培养条件的优化

1材料与方法

1.1材料

1.2培养液的配制

1.3培养条件及生长速率的测定

1.4诱变处理及突变体筛选

1.5形态的观察

1.6多糖含量的测定

2结果与讨论

2.1高产多糖螺旋藻新品系的选育

2.2 Sp-E(HPS)与Sp-E的生长速率和产糖率比较

2.3环境因子对Sp-E(HPS)生长和多糖含量的影响

2.4 Sp-E(HPS)和Sp-E中遗传因子对多糖合成的贡献率比较

2.5 Sp-E(HPS)高产多糖优化培养模式的建立

第四章Sp-E(HPS)的分子鉴定及其高产多糖相关蛋白的初步研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与讨论

2.1 Sp-E和Sp-E(HPS)蛋白质水平的分子鉴定

2.2环境因子对Sp-E(HPS)多糖合成的蛋白质水平调控研究

主要参考文献