肝癌血管生成机理探讨及EGCG抑制血管生成的实验研究

摘要

该研究采用逆转录聚合酶联方法和蛋白印记方法评估VEGF/KDR和Angiopoietins/Tie2在肝癌中的表达,目的是探索在肝癌生长及转移中这些促血管生成细胞因子及受体作用的分子机理.结论:1,在切取的肝癌标本中,血管的分布有一定的规律,癌组织中无坏死部位的血管较为丰富,且分布较为混乱,在肿瘤组织边缘同样血管生成较为活跃.2,内皮细胞特异性的信号传导通路,VEGF/KDR和Angiopoietins/Tie2在肝癌组织中明显的活化,推测共同参与肿瘤血管的生成,两者缺一不可.3,上述两条信号传导通路的活化是不协调的,从而导致肿瘤血管在结构和功能上存在明显的缺陷,更有利于肿瘤细胞的生长.4,VEGF、Ang2和Tie2表达上调可能与肿瘤的浸润性及转移有关.该实验的主要目的是观察EGCG对人肝癌细胞株HepG<,2>和人内皮细胞株ECV304增殖的影响,以及对受体酪氨酸激酶磷酸化的抑制作用,揭示EGCG抗肿瘤生长及血管生成的分子机制.结论:1,EGCG可以明显的抑制肝癌细胞HepG<,2>的生长,而对内皮细胞ECV304的影响较小.2,EGCG在基因转录水平抑制内皮细胞受体KDR和Tie2的表达,导致其蛋白合成下降,并且降低他们的磷酸化水平.3,在离体的血管形成实验中,EGCG可抑制内皮细胞ECV304血管网状结构的形成.在裸鼠肝癌模型中,EGCG在较高剂量(50mg/kg)时可显著的抑制肿瘤的生长及血管的生成,并且对机体的生长影响较小.4,该实验证实,EGCG具有抑制肝癌细胞HepG<,2>的生长,又可以抑制肿瘤血管的形成.是一个具有很大潜力的抗肿瘤药物.

目录

第一部分中文摘要

第一部分英文摘要

第二部分中文摘要

第二部分英文摘要

第一部分 肝癌血管生成的分子机制：信号传导通路的不协调活化

引言

材料与方法

一，标本分组

二，主要试剂

三，仪器及设备

四、方法

五、统计学处理

结果

两条通路的表达与肿瘤血管密度的关系

肝癌的浸润性及转移与血管生成的信号传导通路活化的关系

讨 论

参考文献

附图、表

第二部分 在体外EGCG抑制内皮细胞304的血管形成的实验研究

前 言

材料与方法

一，实验材料

二，实验方法

二，统计学处理

结 果

一，EGCG对内皮细胞ECV304及肝癌细胞HepG2增值的影响

二，EGCG对内皮细胞受体KDR和Tie2基因转录水平的影响

三，EGCG抑制内皮细胞受体KDR和Tie2磷酸化的作用

四，EGCG对体外血管生成抑制作用

五，EGCG体内抑制肿瘤生长及血管形成作用

讨 论

小 结

参考文献

附 图

综述一 肿瘤的生长转移与血管生成

综述二 EGCG抑制肿瘤血管生成的作用

致 谢