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系统性红斑狼疮患者外周血细胞中新的人内源性逆转录病毒NP9基因的克隆、鉴定与蛋白表达

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NP9基因是新近从转化的B淋巴细胞和其他恶性肿瘤细胞中发现的一个新的逆转录病毒基因,由人内源性逆转录病毒K(HERV-K)基因组中的ENV基因编码和剪辑的转录产物.由于在转化的B淋巴细胞中逆转录病毒NP9基因编码的多肽主要分布在细胞核内,而SLE患者体内产生的自身抗体常常与细胞核组分相关,这些研究结果使得我们非常有兴趣进一步了解人内源性逆转录病毒NP9基因与SLE的相关性以及可能的分子作用机制.为此,该研究着重对SLE与人内源性逆转录病毒NP9基因的相关性进行研究,并初步探讨其可能致病机理.结论 1.与健康人比较,SLE患者PBMCs中内源性逆转录病毒NP9基因转录产物呈高表达状态,且具有完整的开放阅读框架(ORF);2.利用原核表达载体pQE30成功构建高效原核表达系统,在IPTG诱导下能高效表达NP9重组蛋白,并获得其多克隆抗体;3.SLE患者PBMCs中存在NP9蛋白的表达,而正常人中未检测到,提示SLE患者中存在逆转录病毒产物的高表达;4.NP9蛋白的氨基酸序列中有3个细胞核内定位信号(NLS),提示NP9蛋白位于细胞核内;且其氨基酸序列与一些免疫紊乱相关的因子有较高同源性;5.提示NP9基因在SLE患者PBMCs中转录与翻译可能与SLE免疫功能异常有关,可能参与SLE的发生发展.

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