HGF与MMP-9在SLE中的异常表达及在血管炎发生机制中的作用研究

摘要

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种病因尚不完全明确的系统性自身免疫性疾病,它可以引起包括皮肤、关节、浆膜、心脏、肾脏、神经系统、血液系统等多系统损害,从而引起复杂的临床表现和实验室指标异常.SLE的病理改变多种多样,但基本病理改变为受累组织的血管炎,HGF与MMP-9可能在其中发挥重要作用.为此,通过检测SLE患者血清中HGF与MMP-9水平,并体外培养人脐静脉内皮细胞株(humanumbilical vein endothelial cells,ECV304),观察重组人肝细胞生长因子(recombinant human hepatocyte growth factor,rhHGF)作用于ECV304细胞后MMP-9的表达情况以及药物的影响作用,从而为研究SLE血管炎发生机制以及临床诊断治疗SLE患者提供理论依据.结论1. HGF及MMP-9均参与SLE的发病机制,检测血清HGF及MMP-9水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及观察疾病进展与临床预后的指标,且血清MMP-9水平灵敏度更高,临床意义更大.2.在培养基中加入rhHGF后,rhHGF与受体c-Met结合,促进ECV304细胞增殖,其最适作用浓度为8 ng/ml.3.他克莫思可抑制ECV304细胞增殖及rhHGF所刺激的ECV304细胞增殖;并可抑制ECV304细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达,对rhHGF所刺激的ECV304细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达亦有抑制作用,其最适作用浓度为50 ng/ml.4.米诺环素可抑制ECV304细胞增殖及rhHGF所刺激的ECV304细胞增殖;并可抑制ECV304细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达,对rhHGF所刺激的ECV304细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达亦有抑制作用,其最适作用浓度为200 ng/ml.5.对ECV304细胞而言,他克莫思抑制作用强于米诺环素.在炎性血管性疾病的治疗中,他克莫思及米诺环素均为有效的药物.

目录

英文缩写注释

前言及研究背景

总体思路

实验材料

第一部分SLE患者血清HGF与MMP-9的检测及与疾病活动性的关系

第二部分体外培养ECV304细胞株，观察RHHGF对其表达MMP-9的影响作用

第三部分他克莫思及米诺环素对ECV304细胞的作用以及两者对ECV304细胞表达MMP-9的影响作用

前言

材料

方法

结果

1他克莫思50NG/ML可明显抑制ECV304细胞增殖

2他克莫思可抑制RHHGF所刺激的 ECV304细胞增殖

2米诺环素200NG/ML可明显抑制ECV304细胞增殖

4米诺环素可抑制RHHGF所刺激的 ECV304细胞增殖

5FCM检测ECV304细胞MMP-9的表达

6RT-PCR检测ECV304细胞MMP-9的表达

7透射电镜观察RHHGF作用于ECV304细胞后，细胞超微结构的改变

8HOECHEST染色结果

9HE染色结果

10免疫组织化学染色结果

结论

讨 论

结 论

课题创新点

参考文献

综述一趋化因子与受体在系统性红斑狼疮中的作用探讨

综述二HGF与风湿免疫性疾病

在读博士期间主要业绩及课题资助情况

致谢