浙江汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因遗传多态性研究

摘要

本文采用免疫组织化学SP技术来检测胃癌组织和癌旁组织的NF-κB、VEGF(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白，用亚甲兰染色检测Hp，研究NF-κB的促血管生成作用与胃癌的临床病理学特征之间的联系以及Hp感染和NF-κB、VEGF蛋白表达的关系，并进一步探讨在去除Hp感染因素后与疾病预后的联系，其结果如下： 研究材料与方法：收集我院外科1997年2月至1999年10月间60例手术切除胃癌手术标本，包括癌组织及距癌灶5cm以上的癌旁组织。根据全国胃癌协作组病理规范进行病理诊断和分级，根据国际抗癌联盟(UICC)胃癌TNM分期法行临床分期。应用免疫组化SP法测定胃癌组织和癌旁组织中NF-κB、VEGF蛋白表达，用亚甲兰染色检测Hp。 研究结果： 1.NF-κB的表达在胃癌组织中显著高于癌旁组织，其阳性率为41.7％，10％(P＜0.01)。NF-κB的表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤大小及Lauren分型有关，与Borrmann分型、肿瘤侵润深度、病理类型及脉管瘤栓无关。NF-κB的激活与胃癌的增殖和转移密切相关。 2.VEGF在胃癌中表达明显高于癌旁组织，其阳性率为56.6％，24.1％(P＜0.01)。胃癌中VEGF的表达与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、远处转移、病理类型、脉管瘤栓及肿瘤大小密切相关，与Borrmann分型、Lauren分型无明显相关性。 3.实验结果显示Hp阳性组NF-κB的表达显著高于Hp阴性组，而Hp感染与VEGF表达无明显相关性。经Spearman等级相关性分析发现，无论是否去除Hp感染的因素，NF-κB与VEGF的表达都呈正相关关系。 4.全部患者中，NF-κB阳性组患者5年生存率明显低于阴性组患者，VEGF阳性组患者5年生存率显著低于阴性组，NF-κB、VEGF均阳性组的患者5年生存率明显低于NF-κB、VEGF均阴性组。 Hp阴性患者中，NF-κB阳性组患者5年生存率明显低于阴性组患者，VEGF阳性组患者5年生存率显著低于阴性组，NF-κB、VEGF均阳性组的患者5年生存率明显低于NF-κB、VEGF均阴性组。 研究讨论： 胃癌的病因尚未完全明确，细胞转录水平的过度激活是胃癌的发生过程中的重要环节。NF-κB是一类具有和某些基因上启动子区固定核苷酸序列结合而启动基因转录的功能性蛋白质。肿瘤的侵袭和转移离不开新生血管的形成，在血管形成前期肿瘤的生长和转移主要靠弥散功能，但是当肿瘤的体积超过2～3mm3时就必须依赖新生血管的形成。血管形成(angiogenesis)是一个相当复杂的过程，VEGF作为最强的正调节因子之一，受多种因子的调控。目前的研究表明，NF-κB可能对血管形成具有核心的正调节作用。已发现的血管生成因子如TNFα、IL-8含有NF-κB的特异性结合位点，阻断NF-κB通路能够抑制TNFα诱导的血管生成，同时能抑制TNFα介导的碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)和血管内皮生长因子的表达；用缺氧诱导的有丝分裂原干扰VEGF启动子中的NF-κB结合位点，发现能够明显抑制VEGF的表达，并且该因子能够促使AKT的磷酸化，抑制磷酸化能够使NF-κB和VEGF的表达降低，表明NF-κB通过PI-3K/Akt途径激活VEGF的表达。在本实验中，无论有无Hp感染，NF-κB与VEGF表达均呈正相关，表明NF-κB和VEGF的表达密切相关，提示NF-κB可能促进VEGF表达。 最初的研究表明，Hp通过诱导IκBα降解来激活NF-κB，诱导程度与Hp的生物学特性有关，CagA阳性株的Hp感染可以促进NF-κB的激活，后来发现Hp通过诱导TNF等来增加NF-κB的表达。Hp感染可能影响NF-κB的表达。既往的研究表明NF-κB与胃癌的预后等密切相关，而胃癌患者Hp感染率较高，如何研究去除Hp感染的因素，分析NF-κB和VEGF表达及其与预后之间的关系尚未见报道。生存分析显示，无论是否去除Hp感染的因素，NF-κB与VEGF表达均密切相关，NF-κB、VEGF均为影响患者生存的独立预后因素。 研究结论： 1.NF-κB的表达在胃癌组织中显著高于癌旁组织，与淋巴结转移、远处转移、肿瘤大小及Lauren分型有关。 2.VEGF在胃癌组织中表达明显高于癌旁组织，与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、远处转移、病理类型、脉管瘤栓及肿瘤大小密切相关。 3.结果显示，NF-κB与VEGF的表达呈正相关关系，提示NF-κB促进VEGF的表达。Hp阳性组NF-κB的表达显著高于Hp阴性组，而Hp感染则与VEGF表达无明显相关性。无论是否去除Hp感染的因素，NF-κB、VEGF均为影响患者生存的独立预后因素。

目录

第一章前言

第二章KIR基因在浙江汉族人群中的分布

第三章KIR基因PCR-SSP分型方法的建立和应用

第四章KIR3DL2等位基因多态性分析

第五章KIR2DL3等位基因多态性分析

第六章KIR2DL4等位基因多态性分析

第七章KIR2DS4等位基因多态性分析

攻读学位期间发表论文

综述 杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因分型技术的研究进展

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