血小板糖蛋白受体Ⅱb-Ⅲa复合体基因多态性与冠心病关系的研究

摘要

背景: 冠心病(CHD)是多基因疾病,随着人类基因组计划的迅速发展,冠心病相关基因的定位和识别已成为研究的热点.病理研究观察到冠状动脉粥样斑块破裂,血小板聚集,血栓形成会造成冠心病不稳定型心绞痛和心肌梗死的发生.血小板的聚集形成附壁血栓,血小板可释放出许多细胞因子,进入动脉壁,对促发粥样硬化病变中平滑肌细胞增生起重要作用.血小板性血栓形成由几种血小板膜受体复合体调解,包括血小板糖蛋白(Gp)Ⅰb/Ⅰx,GpⅠa/Ⅱa和GpⅡb/Ⅲa.GpⅡb-Ⅲa复合体是血小板表面纤维蛋白原的Ca2+依赖性受体,调解引起血小板聚集的纤维蛋白原依赖性共同通道.HPA-1a/b的多态现象是由GpⅢa的T→C的碱基替换所致Leu133(HPA-la,P1A1)→Pro(HPA-1b,PlA2)的多态性引起的.HPA-3(Baka/Bakb)是一种常见的Gp Ⅱb的多态现象,是由GpⅡb的重链靠近COOH一端的第843个位点发生由T→G的碱基替换所致.HPA-3a(Baka)在这个位点的基因编码Ile,而HPA-3b(Bakb)的等位基因编码Ser.GPⅢa基因多态性PIal/a2在过去的研究中表明带有PIa2基因型的人群急性冠脉疾病发生率较高.也有研究认为在动脉硬化性脑血栓形成中有GpⅡbIle/Ser843的基因多态性异常. 目的:探索GpⅡb-Ⅲa复合体的基因多态性在中国汉族人群中的分布及其与冠心病的发生、发展的关系. 对象与方法: 一、研究对象 冠心病组:125例冠心病患者选自浙江大学医学院附属第二医院心内科,符合世界卫生组织(WHO)关于缺血性心脏病的命名及诊断标准,所有患者经冠状动脉造影证实.其中男性96例,女性29例,平均年龄63.7±9.6岁. 对照组:105例非冠心病组人群选自浙江大学医学院附属第二医院心内科冠状动脉造影阴性或未达到冠心病诊断标准的患者.其中男性63例,女性42例,平均年龄59.7±11.0岁.本研究人群个体之间无血缘关系. 二、冠状动脉病变的评价冠状动脉造影证实时,以左前降支、左回旋支、右冠状动脉及主要分支中任何一支血管狭窄程度≥50﹪为阳性.并根据累计支数定义为单支、双支和三支病变,累及左主干记做双支病变. 根据WHO关于心肌梗死的诊断标准将冠心病组分为心肌梗死组(86例)和非心肌梗死组(39例). 三、基因组DNA抽提和Gp Ⅱ b-Ⅲa复合体基因多态性检测 1.白细胞基因组DNA抽提:酚/氯仿法提取外周血白细胞DNA. 2.GpⅡb-Ⅲa复合体基因多态性检测:采用PCR-RFLP技术. 四、统计分析资料输入,应用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析.计量资料均采用均数±标准差(X±S)表示,组间均数间统计学差异用t检验,计量资料组间统计学差异用x<'2>检验.基因型和等位基因频率采用直接计数法统计,组间比较采用x<'2>检验.对于偏态分布的资料进行对数转换后达到近似正态分布后于方差齐性后进行单因素的方差检验.以P<0.05为统计学差异有显著性. 结果: 1.浙江地区汉族人群中存在GPⅡb基因多态性,未发现GPⅢa基因多态性.冠心病组和非冠心病组的GpⅡb基因型分布x<'2>值分别为0.130和1.611,p值均>0.05,符合Hardy-Weirlberg平衡. 2.所有样本及冠心病组中GpⅡb基因多态性各基因型在冠心病危险因子(性别、高血压病、糖尿病)中的分布比较发现均无显著性差异. 3.在冠心病组和非冠心病组中因GpⅡb基因多态性形成的aa、ab、bb三种组合基因型分布有显著性差异,冠心病组ab、bb基因型的分布较非冠心病组高.冠心病组b等位基因频率显著高于非冠心病组. 4.对冠心病组按冠状动脉病变支数分组比较GpⅡb基因多态性,等位基因频率有显著性差异,病变支数越多b等位基因频率越高,而各组间基因型分布无显著性差异. 5.冠心病组按临床类型分为心肌梗死组和非心肌梗死组比较GpⅡb基因多态性,两组间基因型分布有显著性差异,ab和bb基因型在心肌梗死组中的分布显著高于非心肌梗死组;等位基因频率也有显著性差异,心肌梗死组中b等位基因频率显著高于非心肌梗死组. 6.吸烟人群GpⅡb基因多态性与冠心病的发生无明显相关性. 7.GpⅡb各基因型对血小板计数、血小板压积、INR、APTT和FBG水平进行比较,发现均无显著性差异. 结论: 1.浙江地区汉族人群中存在GPⅡb基因多态性. 2.b等位基因可能是冠心病发生发展的易感基因. 3.GpⅡb基因多态性可能与冠心病的病变支数、临床类型有关. 4.GpⅡb基因多态性可能与冠心病的危险因子包括性别、高血压病、糖尿病和吸烟史无关. 5.GpⅡb基因多态性可能不影响血小板计数、血小板压积、INR、APTT和FBG水平.

目录

前言

对象与方法

结果

讨论

结论

参考文献

血小板糖蛋白受体Ⅱb-Ⅲa复合体基因多态性研究进展

致谢