具有血小板GPⅡb－Ⅲa受体专一性的新型重组抗栓剂人胰岛素原－KGD嵌合肽的研制

摘要

本项发明基于现代生物化学技术，以人胰岛素原突变体[(CysA6Ser，CysA11Ser，ΔB29－B30，ΔA1)－人胰岛素原]为分子支架，在原C肽位置用特异性含Lys－Gly－Asp(KGD)功能序列CAKGDWNC(半胱氨酸—丙氨酸—赖氨酸—甘氨酸—天冬氨酸—色氨酸—天冬酰胺—半胱氨酸)置换，得到人胰岛素原－KGD嵌合肽重组蛋白质分子。在原核细胞大肠杆菌表达体系中实现高效表达，表达产物经过超声破碎、等电点沉淀、分子筛层析及离子交换层析等实验步骤后获得纯化。理化学性质分析及重要生物学功能检测表明，人胰岛素原－KGD嵌合肽重组蛋白质分子均一性良好，具有较高的GPIIb－IIIa受体识别与结合活性与较强的抗血小板聚集抑制活性，而无胰岛素激素活性及免疫原性，是一类安全高效的新型基因工程重组抗栓多肽制剂，极有希望应用于实际临床医疗实践中。