癌症患者遗传不稳定性的体内外研究及其与四个DNA修复相关蛋白的关系

摘要

本论文主要用彗星试验和微核试验检测肺癌和乳腺癌患者遗传损伤的背景值和由辐射引起的遗传损伤,来评价肺癌和乳腺癌患者的遗传不稳定性,并观察这两种癌症患者在遗传稳定性上的个体差异.同时还用western blotting试验检测肺癌和乳腺癌患者.ATM、DNA连接酶Ⅲ、DNA连接酶Ⅳ和XPF四个蛋白的表达水平.然后分析肺癌和乳腺癌患者遗传不稳定性与四个DNA修复相关蛋白表达水平之间的关系.本研究分两个阶段完成: 第一阶段:用彗星试验、微核试验和hprt基因突变试验检测放疗期间癌症患者的遗传损伤,其目的是评价这三个试验在检测遗传不稳定性中的灵敏度,并观察癌症患者对放疗反应的个体差异. 第二阶段:肺癌和乳腺癌患者遗传不稳定性和DNA修复相关蛋白表达的研究. 本研究选择了患有不同癌症的患者24例,对照23例.病例组和对照组在年龄、性别和吸烟等方面均无显著性差异(p>0.05).在癌症患者接受放疗前和放疗累积剂量达到10、30和50Gy时采集新鲜外周血,对照组仅采血一次.取1ml外周血分离淋巴细胞用于彗星试验,其余血样分别进行培养用于微核试验和hprt基因突变试验,最后分析癌症患者和对照组遗传损伤背景值是否存在差异,并分析放疗累积剂量和遗传损伤之间的剂量一效应关系. 研究得出如下结论： 1.癌症患者在放疗期间所产生的淋巴细胞遗传损伤随着累积放疗剂量的增加而增加,并呈一定的剂量效应关系.癌症患者对放疗的反应存在较大的个体差异. 2.肺癌和乳腺癌患者自发的和由辐射引起的遗传不稳定性均明显高于对照组.肺癌和乳腺癌患者淋巴细胞对辐射的敏感性存在较大的个体差异. 3.彗星试验和微核试验是两种快速、简便、有效的检测癌症患者淋巴细胞自发的以及由辐射引起的遗传不稳定性的方法.这两个方法均可用于癌症患者放疗前淋巴细胞放射敏感性的测定,可为癌症患者治疗方案的制定提供依据. 4.无论肺癌或乳腺癌患者,和对照组相比,四个DNA修复相关蛋白表达均有不同程度的下降,但肺癌患者ATM、DNA连接酶III和XPF三个DNA修复相关蛋白表达水平与对照组有明显差异;而乳腺癌患者ATM、DNA连接酶Ⅲ、DNA连接酶Ⅳ和XPF四个DNA修复相关蛋白表达水平与对照组有明显差异.因此,同一蛋白的表达水平在不同的癌症患者中可能有差异. 5.癌症患者DNA修复相关蛋白表达水平的降低可能与其遗传不稳定性的升高之间有一定的相关性,在本研究中也发现了一些相关性,但是由于遗传不稳定性的升高是一个受多方面因素影响的结果,而且与DNA修复相关的蛋白种类很多,所以很可能单个蛋白表达的降低或升高在不同种类的肿瘤或不同的个体有一定的差异.今后的应当同时研究多种细胞周期调控蛋白和与DNA修复相关的蛋白.

目录

缩略语

前言

材料与方法

结果

一、第一部分结果：

二、第二部分结果：

讨论

结论

参考文献

综述一 环境肿瘤分子流行病学的生物标志物

综述二 遗传不稳定性和电离辐射

在攻读期间发表的论文和获得奖励

致谢