幽门螺杆菌aphA及ahpC基因在克拉霉素药物压力下的表达研究

摘要

目的：培养幽门螺杆菌标准菌株，分析在克拉霉素药物压力下幽门螺杆菌基因的表达情况；进而研究幽门螺杆菌在药物选择压力作用下菌体的生长情况，分析aphA及ahpC基因的表达，探索aphA及ahpC基因在幽门螺杆菌克拉霉素药物选择压力过程中的表达变化。 方法：将幽门螺杆菌标准菌株NCTC 26695，接种于含7％-10％绵羊血的幽门螺杆菌培养基，37℃微需氧环境培养3-5天，将幽门螺杆菌分成克拉霉素诱导压力组和克拉霉素非诱导压力组，每组培养10天。克拉霉素药敏试验采用E-Test法，药物浓度梯度为小于0.016μ/mL，用该浓度药物诱导幽门螺杆菌10天，提取幽门螺杆菌菌体RNA，反转录PCR扩增幽门螺杆菌cDNA，选取幽门螺杆菌aphA及ahpC基因特异性引物进行PCR扩增，以幽门螺杆菌gyr基因作为对照内参基因，通过琼脂糖凝胶电泳分析aphA及ahpC两个基因的表达变化。 结果：选取克拉霉素浓度为小于0.016μ/mL进行诱导幽门螺杆菌菌体。aphA及ahpC基因的PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳，并与gyr基因进行比较，用Bio-rad软件进行PCR产物亮度分析。结果表明培养5-10天后，用药组和非用药组的aphA基因与gyr基因的亮度比值分别为：0.63、0.68、1.16、0.70、1.16、1.03、1.20、1.04、1.54、1.41、0.45、0.77、0.74、0.75、0.77、0.64、0.70、1.02、0.85、0.73。ahpC基因与gyr基因的亮度比值分别为：1.67、1.32、1.35、1.56、1.23、1.14、1.52、1.46、1.25、1.17、1.22、1.27、1.39、1.22、1.46。aphA基因用药组与非用药组的比值分别为：1.4、0.88、1.56、0.93、1.50、1.60、1.71、1.01、1.81、1.93：ahpC基因用药组与非用药组的比值分别为：1.36、1.03、0.97、1 32、 1.15、 0.87。 结论：通过克拉霉素诱导幽门螺杆菌培养会引起菌体基因aphA及ahpC与菌体内参基因gyr相比表达量有明显的升高。表明在克拉霉素外界药物压力作用下，幽门螺杆菌自身基因会产生变化，本研究结果为进一步研究幽门螺杆菌在外界其他压力作用下菌体基因水平调控的信号网络通路提供可靠的实验数据。

目录

论文说明：中英文对照及缩略语

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

结论

综述幽门螺杆菌感染的黏膜免疫损伤机制及治疗进展

致谢