黄山木兰和丹参中具有醌还原酶活性的成分研究

摘要

醌还原酶(Quinone Reductase: QR)是体内化学预防肿瘤发生的重要二相酶之一，本研究拟从植物中发现具有QR活性的物质。
　　 本实验首先对秦皮、丹参、伞花木等数十种植物的提取物进行QR活性的筛选，在此基础上选取黄山木兰(Magnolia cylindrica)提取物二氯甲烷部分和丹参(Salvia miltiorrhiza)水溶性成分提取物进行深入研究。
　　 利用现代色谱和鉴定手段从黄山木兰中分离鉴定了8个化合物，多数为木脂素类化合物，分别是syringin、lariciresinol4-O-glucoside、conicaoside、(+)-syringaresinolO-β-D-glucopyranoside、鹅掌楸树脂酚A、1-(α-L-rhamnosyl(1-6)-β-D-glucopyranosyloxy)-3，4，5-trimethoxybenzene、刺五加苷E和西洋参素L1，以上8个化合物均为首次从该植物中分离得到。
　　 丹参水溶性成分提取物主要成分为丹参酚酸B、迷迭香酸、紫草酸，均能与GSH发生结合反应，并用GSH来模拟细胞内化合物与Keapl的结合反应；然而体外QR活性筛选却表明无论是提取物还是上述的单体化合物均显示微弱的QR活性；分析原因认为主要是丹参水溶性成分不易被细胞吸收导致QR活性弱，因此对该部分进行甲基化修饰，发现甲基化修饰后提取物、迷迭香酸、紫草酸甲基化产物QR活性显著提高，并且在细胞内检测到迷迭香酸、紫草酸甲基化产物和它们与GSH结合产物的信号，丹参酚酸B甲基化产物QR活性未有改变，细胞内检测到丹参酚酸B甲基化产物的信号但是体外未发现其与GSH结合产物的信号。

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致谢

绪论

第一部分 植物提取物QR活性粗筛选

1.1材料与方法

1.1.1材料

1.1.2方法

1.2结果

第二部分 黄山木兰化学成分研究

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果

2.2.1分离得到的化合物

2.2.2结构解析

2.2.3化合物QR活性筛选

2.3讨论

第三部分 丹参水溶性成分QR活性测定及其结构修饰

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果

3.2.1 DS-n-BuOH单独进样以及其与GSH反应的LC-MS测定结果

3.2.2 DS-n-BuOH以及其主要成分QR活性筛选结果

3.2.3 SaB、LA、RA的细胞吸收情况

3.2.4 DS-n-BuOH的甲基化修饰及其LC-MS测定结果

3.2.5 DS-n-BuOH-nCH3以及其主要成分QR活性筛选结果

3.2.6 LA-nCH3、RA-nCH3、SaB-nCH3的细胞吸收情况

3.2.7 WB检测细胞内Nrf2蛋白表达变化

3.3讨论

参考文献

作者简历及在读期间所取得的科研成果

附图