天然来源有效成分的逆流色谱分离方法研究

摘要

逆流色谱(Countercurrent Chromatography，CCC)是一种无需固态载体的液液分配色谱技术。相较于传统的分离方式，逆流色谱具有对样品破坏小，分离量大，回收率高，节约溶剂等优点。本论文以天然产物粗提物为研究对象，通过逆流色谱技术并结合多级串联质谱等技术分离纯化分析天然产物中的有效活性成分。具体如下：
　　 1.应用逆流色谱技术分离纯化天然产物紫背菜甲醇：水1:1提取物中正丁醇部的黄酮类化合物。通过两步逆流色谱分离获得了纯化合物(第一步溶剂体系：比例为1:6:1:6的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水。第二步溶剂溶剂：比例为1:3:1:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水。)。经过FTICR-MS和ESI-MSn分析推测该化合物为一个四羟基黄酮葡萄糖苷。
　　 2.建立了一种逆流色谱与液质联用技术联合用以分析天然产物中有效成分的方法。以天然产物云南地不容的极性成分为研究对象，应用逆流色谱技术从中成功分离获得了两种生物碱类化合物stepharine和corydine。同时通过多级高分辨质谱研究标准化合物的质谱碎裂规律，用以分析样品中存在的其他微量相似结构化合物。该方法可逐步扩展为应用逆流色谱分离纯化天然产物中大组分化合物标准品，再辅以高分辨质谱和液质联用技术，分析天然产物中成分较为微量的同类化合物，实现对天然来源样品中大组分与小组分化合物的全方位分析。