血清游离轻链在多发性骨髓瘤中的临床应用

摘要

[背景和目的]
　　多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是起源于生发中心B细胞的浆细胞异常增生的恶性肿瘤，常由一种称为不明意义丙种球蛋白增多血症(monoclonalgammopathy of undetermined significance，MGUS)的疾病发展而来。MM临床诊断的实验室检查方法主要有血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis，SPE)、免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis, IFE)、毛细管区带电泳(capillaryzoneelectrophoresis，CZE)、尿本周氏蛋白测定、血清免疫球蛋白定量、血清和尿液轻链的测定等，但由于灵敏度和特异性等方面的原因，部分MM患者可能漏诊。近年来很多临床研究显示血清游离轻链(serum free light chain，sFLC)在MM患者临床诊断、疗效判定和病情监测等方面均具有较高的应用价值。国际骨髓瘤协作组2006年最新的MM疗效评价系统中已将sFLC指标作为MM尤其是寡分泌型和不分泌型MM患者诊断及疗效评估的重要标准。本研究利用全自动免疫分析仪，采用散射比浊法测定本地区健康人群和MM患者血清中κ-FLC和λ-FLC水平，并计算血清κ-FLC/λ-FLC比值，确定本地区人群正常参考范围，探讨血清FLC在MM患者临床诊断和治疗疗效评价中的意义，为MM患者的临床诊治提供依据。
　　[对象和方法]
　　1.研究对象
　　筛选2012年5月-2013年5月在浙江大学附属第一医院血液科就诊并明确诊断为MM的患者111例作为MM疾病组，30例其他血液系统疾病患者（排除原发性AL型淀粉样变性、浆细胞瘤、单克隆γ球蛋白增多症）、40例肾功能不全患者（排除MM引起的肾功能不全）和36例其它良恶性疾病患者作为其他疾病组，同时选取在我院进行健康体检人群（肝功能、肾功能、血常规和尿常规检查无异常）200例作为正常对照组，结合临床资料将研究对象分为A、B、C、D、E五组，具体分组情况如下:
　　A组，MM患者，111例，其中男性68例，女性43例，男女比例1.58∶1，年龄39-82岁，平均年龄59.6±10.6岁。其中IgA型28例，IgG型68例，IgM型1例，IgD型1例，轻链型13例;κ型58例，λ型53例，见表2.2。所有患者均符合MM诊断标准[1]，排除原发性AL型淀粉样变性、浆细胞瘤、单克隆γ球蛋白增多症等其它疾病，无合并的其它肿瘤存在。111例MM患者中，22例为初次诊断患者。111例MM患者中，对其中79例MM患者进行随访。
　　B组，其它血液系统疾病患者，30例，其中男性14例，女性16例，年龄15-84岁，平均年龄53.3±17.0岁。包括淋巴瘤、急性髓系白血病、慢性粒细胞白血病和缺铁性贫血等疾病（排除原发性AL型淀粉样变性、浆细胞瘤、单克隆γ球蛋白增多症等其它疾病）患者。
　　C组，肾功能不全患者，40例，其中男性22例，女性18例，年龄20-81岁，平均年龄54.8±15.9岁。所有患者均排除MM引起的肾功能不全。
　　D组，其它良恶性疾病患者，共36例，其中男性20例，女性16例，年龄22-81岁，平均年龄58.5±15.7岁。
　　E组，正常对照组，200例，年龄21-79岁，平均年龄42.7±13.6岁。其中男性104例，女性96例。所有入选者肝功能、肾功能、血常规和尿常规检查均无异常。
　　2.实验方法
　　(1) MM患者血清标本的采集与保存
　　采集所有入选MM患者（包括随访患者）化疗前空腹静脉血5ml，分置于3个促凝管，静置2小时后，3000rpm离心10分钟，取上层血清分装于EP管中，置于-78℃保存。
　　(2) MM患者尿液标本的采集与保存
　　取所有入选MM患者（包括随访患者）化疗前晨尿2ml，3000rpm离心10分钟，取上清液分装于EP管中，置于-78℃保存。
　　(3)其它血液系统疾病患者、肾功能不全患者、其它良恶性疾病患者和正常对照组标本的采集与保存
　　采集所有入选者空腹静脉血3ml，静置2小时后，3000rpm离心10分钟，取上层血清分装于EP管中，置于-78℃保存。
　　(4)血清FLC的检测
　　利用BNII全自动免疫比浊仪采用定时散射比浊法的原理测定血清FLC。
　　(5)血清免疫球蛋白A、G、M(IgA、IgG、IgM)的检测
　　利用BNII全自动免疫比浊仪采用定时散射比浊法的原理测定血清免疫球蛋白A、G、M。
　　(6)血清轻链（kappa和Lambda轻链）和尿轻链（尿kappa和Lambda轻链）的检测
　　利用IMMAGE800全自动免疫分析仪采用速率散射比浊法的原理对血清轻链（kappa和Lambda轻链）和尿轻链（尿kappa和Lambda轻链）进行检测。
　　(7) SPE的检测
　　利用全自动琼脂糖凝胶电泳分析仪，采用醋酸纤维素薄膜作为电泳的支持介质进行SPE的检测。
　　(8)血清IFE的检测
　　利用Spife3000全自动琼脂糖凝胶电泳分析仪进行血清IFE的检测。
　　(9)数据的统计学处理采用SPSS16.0统计软件中的相关方法。
　　[结果]
　　1.200例健康人群血清κ-FLC介于5.60～31.75mg/L之间，血清λ-FLC介于5.42～49.38mg/L之间，血清κ-FLC/λ-FLC比值介于0.34～1.75之间，95％可信区间分别为:血清κ-FLC，6.08～25.40mg/L;血清λ-FLC，7.66～32.70mg/L;血清κ-FLC/λ-FLC比值，0.32～1.24。
　　2.200例健康人群中，不同性别、不同年龄人群血清FLC水平无显著差异。
　　3.111例MM患者血清κ-FLC、血清λ-FLC和血清κ-FLC/λ-FLC比值分别为:157.12.19±370.10，256.69±991.39，15.05±39.60。MM患者组血清κ-FLC、血清λ-FLC和血清κ-FLC/λ-FLC比值水平与其他血液疾病患者组、肾功能不全患者组、其它良恶性疾病患者组和正常对照组之间均有显著差异，而其他4组之间均无显著差异。
　　4.22例初诊MM患者中，所有患者血清FLC水平均异常，21例患者IFE结果阳性，20例患者SPE结果阳性，20例患者血清轻链（Kappa和Lambda轻链）异常，18例患者尿轻链（kappa和Lambda轻链）异常。
　　5.79例随访MM患者中，4例疗效评价为完全缓解(CR)，28例疗效评价为部分缓解(PR)，11例疗效评价为疾病进展(PD)，35例疗效评价为疾病稳定(SD)。不同随访时间点血清κ-FLC、血清λ-FLC和血清κ-FLC/λ-FLC比值较好反应患者治疗疗效的变化，尤其血清κ-FLC/λ-FLC比值与治疗疗效的变化高度一致。
　　[结论]
　　(1)血清FLC在MM患者的临床诊断中有重要意义，其灵敏度高于血清IFE、SPE、血清轻链和尿轻链。
　　(2)血清FLC可用于MM患者的临床治疗疗效的评价和监测。

目录

声明

致谢

摘要

缩写注释表

1 前言

2 材料与方法

2．1 临床资料

2．2 实验材料

2．3 实验方法

2．4 统计学处理

3 结果

3．1 本地区人群血清FLC正常参考范围

3．2 血清FLC在多发性骨髓瘤(MM)中的应用

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 多发性骨髓瘤血清游离轻链检测的研究进展

作者简介及在读期间所取得的科研成果