白花败酱单宁的提取、分离及活性研究

摘要

白花败酱为中国传统药食两用植物，具有清热解毒、活血化瘀之功效，临床应用广泛。但对其活性成分研究却较少，据之前研究发现，白花败酱中单宁类物质具有良好的治疗便秘的效果，因此，本文主要对其单宁组分进行了研究，考察有机溶剂浸提及超声波提取方法对其提取效率的影响，确定最佳提取工艺，并通过大孔树脂柱层析及葡聚糖凝胶层析方法对其进行了分离纯化，以得到其主要活性单宁成分，并对不同级分进行了抗氧化及抑菌实验，确定其活性功能，为其利用提供科学依据。本文主要内容及结果如下：
　　1)分别考察了有机溶剂提取及超声波提取的最佳提取工艺条件，以提取率为指标，研究发现，超声波提取耗时短、提取率高、溶剂消耗量小，当料液比为1:60、提取时间为60min、提取功率为80 W时，白花败酱单宁有最大提取率4.648％。
　　2)分别考察了3种大孔树脂对白花败酱粗提物的除杂效果，通过静态吸附及解吸实验确定较优大孔树脂，对其进行动态吸附及解吸研究，确定最佳分离工艺，对初步纯化物又进行了Sephadex LH-20柱分离，以得到不同组分，对其活性及结构分析。实验结果表明，40%甲醇洗脱液中的单宁组分含量较高。
　　3)通过研究不同分离样品的总抗氧化能力、对二苯基苦基苯肼自由基（DPPH·）、超氧阴离子自由基（O2-·）、羟基自由基(·OH)清除能力，考察其抗氧化生理活性，为其他功能研究及活性成分鉴定提供基础。
　　4)为确定其抑菌活性，考察了不同分离样品对5种食品常见细菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、鼠伤寒沙门氏菌)和3种真菌(黑曲霉、黄曲霉、啤酒酵母)的抑制效果，并与常用食品防腐剂山梨酸钾作对比，实验结果表明，白花败酱单宁粗提物及Sephadex LH-20分离组分1均可以明显抑制大肠杆菌生长，1.0 mg/ml浓度的抑菌率分别为50.78%和50.48%，明显高于对照品山梨酸钾的30.45%，对其他细菌也有同样发现，但对真菌无明显抑制作用。

目录

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致谢

摘要

第一章 文献综述

1 白花败酱的研究进展

1．1 白花败酱的品种鉴定及比较

1．2 白花败酱的化学成分研究

1．3 白花败酱的药理作用研究

2 植物单宁的研究进展

2．1 植物单宁的提取研究现状及进展

2．2 植物单宁的分离纯化研究现状及进展

2．3 植物单宁的含量测定研究进展

2．4 植物单宁的生理活性研究进展

3 研究目的和意义

第二章 白花败酱单宁的提取工艺研究

1 引言

2 材料与设备

2．1 材料和试剂

2．2 设备

3 实验方法

3．1 白花败酱单宁含量的测定

3．2 有机溶剂提取法工艺条件的研究

3．3 超声波提取法工艺条件的研究

4．结果与分析

4．1 有机溶剂提取法工艺条件的研究

4．2 超声波提取法工艺条件的研究

5 小结

第三章 白花败酱中单宁的分离纯化

1 引言

2 实验材料

2．1 材料和试剂

2．2 实验仪器与设备

3 实验方法

3．1 白花败酱中单宁的分离纯化工艺路线

3．2 大孔树脂的预处理

3．3 大孔树脂静态吸附实验

3．4 大孔树脂静态解吸实验

3．5 大孔树脂动态柱层析实验

3．6 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20分离初步纯化物

4 结果与分析

4．1 大孔树脂的筛选

4．2 大孔树脂动态柱层析实验

4．3 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20分离初步纯化物

5 小结

第四章 白花败酱中单宁的抗氧化作用研究

1 引言

2 实验材料

2．1 材料和试剂

2．2 实验仪器与设备

3 实验方法

3．1 白花败酱单宁总抗氧化能力的实验研究

3．2 白花败酱单宁DPPH·清除能力的实验研究

3．3 白花败酱单宁清除O2-·能力的实验研究

3．4 白花败酱单宁清除·OH能力的实验研究

4 结果与分析

4．1 白花败酱单宁的总抗氧化能力

4．2 白花败酱单宁对DPPH·的清除能力

4．3 白花败酱单宁对O2-·的清除能力

4．4 白花败酱单宁对·OH的清除能力

5 小结

第五章 白花败酱单宁的抑菌活性研究

1 引言

2 实验材料与设备

2．1 材料和试剂

2．2 实验仪器

3 实验方法

3．1 制备滤纸片、菌悬液、不同浓度样品溶液

3．2 制作培养基平板

3．3 抑菌圈大小的测定

3．4 最低抑菌浓度(MIC)的测定

4 结果与分析

4．1 不同样品的抑菌圈大小

4．2 不同样品对细菌的抑制率及最低抑制浓度

5 小结

第六章 结论与展望

1 本文主要结论

2 展望

参考文献

作者简介及科研成果