融合激酶KIF5B-RET通过多途径激活STAT3信号通路促进肺癌细胞增殖

摘要

目的:肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，发病率与死亡率均居恶性肿瘤首位。非吸烟患者肺癌的发生往往借助癌基因、分子信号的过度活化，已证实多种驱动基因如EGFR(10～50％)，KRAS(10～30％)，ALK(5％)等是非小细胞肺癌发生发展的重要诱导因素。KIF5B-RET融合基因是最近在非小细胞肺癌中发现的一个新的潜在的癌基因，但目前KIF5B-RET如何激活特定信号传导通路实现细胞转化及致癌作用则还不清楚。STAT3已被证实与一系列细胞生物过程如存亡、增殖、分化等有关，在多种肿瘤包括肺癌中存在持续活化的情况。本次研究旨在探索KIF5B-RET融合基因在非小细胞肺癌发生发展过程中的重要作用，以及STAT3（信号传导及转录激活因子3）在上述过程中起到的作用。
　　方法:用RT-PCR法筛选中国人群非小细胞肺癌的KIF5B-RET融合阳性患者。通过基因重组的方法建立稳定表达KIF5B-RET融合蛋白的肺癌细胞系，通过生长曲线、平板克隆以及裸鼠成瘤等体内外实验验证该融合激酶的致癌活性。进一步通过western blot、抑制剂实验、免疫共沉淀和激酶活化等实验探索KIF5B-RET融合激酶下游相关机制。
　　结果:1.筛选到1例KIF5B-RET融合基因阳性患者，比例约1.0％。2.体内和体外实验显示KIF5B-RET融合蛋白显著增强阳性肺癌细胞的增殖能力。3.Western blot实验表明STAT3信号通路在KIF5B-RET在调控细胞增殖的机制中起重要作用。抑制剂实验、免疫共沉淀和激酶活化实验提示KIF5B-RET激酶融合可以多途径活化STAT3Tyr705和Ser727两个位点的磷酸化从而促进细胞增殖。
　　结论:明确了KIF5B-RET在促进肺癌细胞生长和致瘤过程中的重要作用，以及STAT3信号的持续激活在该过程中扮演重要角色;而且KIF5B-RET-STAT3通路相关的小分子抑制剂能明显抑制阳性肺癌细胞生长，为开发KIF5B-RET阳性肺癌患者的治疗药物提供思路。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词

1．前言

2．实验材料和方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3．实验结果

3．1中国肺腺癌患者中检测到1例KIF5B-RET融合基因

3．2 KIF5B-RET融合蛋白持续活化促进肺癌细胞增殖

3．4 KIF5B-RET共同激活STAT和MAPK信号通路促进细胞增殖

3．5 KIF5B-RET多途径活化STAT3 Tyr705和Ser727位点

3．6下调KIF5B-RET活性或阻断其下游信号通路明显抑制阳性细胞增殖能力

4．讨论

参考文献

综述 RET融合基因在肺癌中的研究现状

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