矢车菊素-3-葡萄糖苷改善胰岛功能及PVP-SPIO对胰岛示踪的应用

摘要

目的：胰岛移植是治疗胰岛素依赖糖尿病的有效方法，但仍然面临移植效率低、缺乏供体及有效的监测工具。胰岛由于本身缺乏抗氧化能力，难以耐受氧化应激的刺激。因此，本研究旨在探讨抗氧化剂矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)能否改善移植入肾包膜下或门静脉的胰岛的功能。同时探究本课题组自主合成的聚乙烯吡咯烷酮包裹的超顺磁氧化铁纳米颗粒(PVP-SPIO)能否安全有效的监测移植的新生猪胰岛。
　　方法：B6小鼠胰岛经不同浓度的C3G处理后，检测其存活率、抗氧化相关基因(HO-1)以及抗凋亡基因（β-catenin、Bcl-2和Survivn）的表达。监测经C3G(1.0μM)处理或未处理的B6小鼠胰岛（100，200和400 IEQ）移植入糖尿病B6小鼠的肾包膜下或门静脉内，监测其移植100天的血糖变化。PVP-SPIO标记的新生猪胰岛移植入免疫缺陷的糖尿病小鼠肾包膜下。小鼠在血糖正常后进行免疫重建。磁共振检测新生猪胰岛琼脂糖凝胶及接受移植及免疫重建的小鼠。
　　结果：经C3G处理的胰岛较未处理的胰岛存活率明显提高，其HO-1、β-catenin、Bcl-2和Survivin的表达呈浓度依赖性升高。所有移植C3G处理胰岛的小鼠较移植未处理胰岛的小鼠更快的达到了正常血糖水平。肾包膜下移植400、200或100 IEQ的C3G处理后胰岛的小鼠血糖均恢复正常，而在未处理组中，仅移植400和200IEQ的小鼠达到了正常血糖水平。门静脉内移植400和200IEQ经C3G处理胰岛的小鼠与400IEQ未处理胰岛的小鼠恢复了正常血糖。新生猪胰岛能够为MRI清楚地检测到。所有移植PVP-SPIO标记胰岛的小鼠均逆转了糖尿病。移植后第2天直至100天后，移植物能够被MRI检测到。免疫排斥后，移植物区域明显增大，并可见混合强度信号。
　　结论：本研究的结果提示C3G能提高小鼠胰岛的存活率，改善其移植后的功能。PVP-SPIO标记不影响新生猪胰岛的功能，且可帮助检测移植的新生猪胰岛排斥发生前后的形态学变化。

目录

声明

致谢

序言

摘要

缩略词表

第一部分 矢车菊素-3-葡萄糖苷改善移植小鼠胰岛的功能

1．1 前言

1．2 材料与方法

1．2．1．主要材料及设备

1．2．2．主要试剂的配制

1．2．3．C3G提取物的准备，高效液相层析(HPLC)分析

1．2．4．实验方法

1．3 结果

1．3．1．C3G能提高体外胰岛的存活率

1．3．2．C3G在体外上调胰岛HO-1、Bcl-2和Survivin基因的表达

1．3．3．C3G对β-catenin和Survinin 蛋白表达的影响

1．3．4．C3G改善肾包膜下移植胰岛的功能

1．3．5．C3G改善经门静脉肝内移植的胰岛的功能

1．3．6．腹腔注射葡萄糖耐量试验

1．3．7．移植胰岛的免疫组织化学分析

1．4．讨论

1．5．结论

第二部分 PVP-SPIO标记新生猪胰岛的MRI示踪

2．1．前言

2．2．材料与方法

2．2．1．主要材料与设备

2．2．2．PVP-SPIO的合成

2．2．3．实验方法

2．3．结果

2．3．1．MRI检测琼脂糖凝胶中PVP-SPIO标记的胰岛

2．3．2．小鼠肾包膜下移植的PVP-SPIO标记的NPI可以通过MRI检测到

2．3．3．PVP-SPIO标记的新生猪胰岛在肾包膜下移植后及免疫重建后不同时间点的MR图像

2．3．4．肾包膜下移植的PVP-SPIO标记的新生猪胰岛在免疫重建前后的MR图像对比

2．4．讨论

2．5．结论

参考文献

综述 胰岛移植治疗1型糖尿病的进展与展望

作者简历及在学期间所取得的科研成果