上转发光免疫层析法检测乙肝病毒外膜大蛋白在不同类型慢性肝病中的临床意义

摘要

目的：建立上转发光免疫层析技术(UPT-LF)检测乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)的方法，和酶联免疫吸附测定(ELISA)法进行比较，并分析此法用于乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)在慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、乙肝原发性肝癌(PHCC)患者血清中水平变化及血清检测的临床价值。
　　方法：利用上转发光材料UCP作为示踪剂结合免疫层析技术组装乙肝病毒外膜大蛋白定量试纸条。利用基于上转发光法的免疫层析检测技术(UPT)检测260例慢性乙型肝炎、190例乙肝肝硬化及45例乙肝原发性肝癌患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）的含量;化学发光法检测乙肝E抗原（HBeAg）含量;实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒核酸（HBV DNA）。另外选取60例健康体检者作为对照组，同时用上转发光免疫层析法和ELISA法检测其血清HBV-LP的含量。分析乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)检测在不同疾病状态的诊断中的意义。
　　结果：⑴成功建立基于上转发光免疫层析技术定量检测HBV-LP的试纸条;产品相关性能检测结果良好，最低检测限约为0.1 U/ml，cut-off值约为1.0 U/ml，批内与批间CV％均小于15％。⑵60例健康体检人员血清经UPT-LF法检测，HBV-LP含量均小于1U/ml，特异性为100％，ELISA法检测结果显示59例血清标本HBV-LP阴性，另一例阳性，特异性为98.3％。⑶495例乙肝患者血清标本同时采用UPT-LF法与ELISA法检测HBV-LP，两种方法检测总符合率为91.7％，UPT法检测HBV-LP阳性率为58.5％，ELISA法检测HBV-LP阳性率为59.5％。⑷HBV-LP阳性结果浓度水平CHB组主要以＞40 U/ml的高浓度为主，LC组和PHCC组主要集中在＜10 U/ml的低浓度范围内。⑸HBeAg、 HBV DNA和HBV-LP的阳性率均表现为CHB组＞LC组＞PHC组，HBeAg和HBV DNA在LC和PHCC患者中的阳性率均明显低于CHB患者，差异有统计学意义(P＜0.01)。⑹HBV-LP在LC和PHCC患者中的阳性率明显高于HBV DNA和HBeAg，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：上转发光免疫层析法检测血清HBV-LP简便、快捷、可靠，特异性优于ELISA法，并且HBV-LP的检测对于慢性肝病进展的诊断以及疗效监测有重要的价值。

目录

声明

论文说明

致谢

摘要

中英文缩略词

1 研究背景

2 材料与方法

2．1 材料

2．2 试剂及实验仪器

2．3 方法

3 结果

3．1 UPT-LF试纸条组装成功

3．2 产品性能指标检测结果

3．3 60例健康体检人员血清HBV-LP检测结果

3．4 UPT-LF法与ELISA法检测HBV-LP结果比较

3．5 495例乙肝病毒感染患者HBV-LP、HBV DNA及HBeAg阳性率比较

3．6 不同类型慢肝病HBV-LP检测结果浓度分布

3．7 不同类型慢性肝病HBeAg、HBV DNA和HBV-LP阳性率比较分析

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 乙型肝炎病毒外膜大蛋白及其检测的研究进展

作者简介