MiR-126调控cofiliN-1与上皮性卵巢癌侵袭转移关系的研究

摘要

研究目的:
　　卵巢癌因其进展迅速，容易腹腔内广泛转移，因此在确诊时多数患者已处于晚期，目前已经成为妇科致死率最高的肿瘤之一。卵巢癌细胞恶性生物学行为强，大部分患者接受标准化治疗后2年左右出现肿瘤复发及耐药，因此晚期卵巢癌患者5年生存率较低。近年来研究表明各种miRNA可通过作用于mRNA转录后水平在肿瘤发生发展中起到抑癌或促癌作用。对于miR-126，有研究表明在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多种肿瘤发生发展中起着抑癌基因的作用，但其在卵巢癌中的作用尚不明确。丝切蛋白(Cofilin)是一种肌动蛋白结合蛋白，在细胞骨架重塑和移动调节上起着重要作用，而卵巢癌等恶性肿瘤细胞的分裂、迁移及特异性结构依赖于细胞骨架的动力学调节。为此本研究拟通过体外培养SKOV3卵巢癌细胞株并转染不同miR-126基因片段，比较miR-126与Cofilin-1表达之间的关系，以此研究miR-126是否可通过调控conflin-1而参与卵巢癌细胞的侵袭转移的调节。
　　研究方法:
　　本研究将人卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞株进行体外培养，miR-126通过慢病毒的包装后转染人卵巢浆液性囊腺癌SKOV3细胞系，上述卵巢癌细胞分成四组，分别为:miR-126过表达组（SKOV3+LV3-has-miR-126组）、miR-126抑制表达组（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor组）、转染阴性对照组(SKOV3+LV3NC组)和空白对照组（SKOV3组），实验采用Transwell侵袭实验观察各组细胞的侵袭能力，通过免疫荧光法观察cofilin-1表达水平的差异。
　　研究结果:
　　1.Transwell侵袭实验的结论表明miR-126过表达组(SKOV3+LV3-has-miR-126组SKOV3细胞侵犯基质胶的穿膜细胞数明显少于miR-126抑制表达组（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor组）(P＜0.05)，同时也明显少于转染阴性对照组（SKOV3+LV3NC组）和空白对照组（SKOV3组）的穿膜细胞数（P均＜0.05）。
　　2.免疫荧光检测结果显示，LV3-has-miR-126组细胞Cofilin-1表达明显低于miR-126抑制表达组（SKOV3+LV3-has-miR-126 inhibitor组）、转染阴性对照组（SKOV3+LV3NC组）和空白对照组（SKOV3组），而LV3-has-miR-126 inhibitor组Cofilin-1表达明显高于转染阴性对照组（SKOV3+LV3NC组）和空白对照组（SKOV3组）。
　　研究结论:
　　1.miR-126过表达可以减弱SKOV3细胞侵袭能力，提示miR-126过表达可能抑制卵巢癌细胞的侵袭转移。
　　2.转染miR-126的SKOV3细胞cofilin-1表达明显减少，提示miR-126可能通过抑制cofilin-1表达，进而影响细胞骨架而抑制卵巢癌细胞的侵袭转移。

目录

声明

致谢

摘要

1 前言

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

2．3 统计学处理

3 结果

3．1 SKOV3细胞转染后形态学观察

3．2 Transwell侵袭实验

3．3 免疫荧光实验

4 讨论

5 结论

参考文献

细胞骨架蛋白与卵巢癌侵袭转移关系的研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果