罗格列酮对哮喘大鼠气道平滑肌收缩的影响

摘要

目的：支气管哮喘(以下简称哮喘)是以气道高反应性为特征的慢性炎症性疾病,被世界医学界公认为四大顽症之一。其病理学改变以气道内嗜酸性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞和巨噬细胞浸润为主。尽管近年来对哮喘发病机制和治疗的研究取得了一定进展,但其发病率在世界范围内仍有增高的趋势,并且部分病例常规治疗效果不理想。因此,对哮喘发病机理的深入研究和寻找其他有效的治疗方法具有非常重要的意义。本文旨在通过在体和离体气管环试验探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(Peroxiso-ome proliferator activated receptorγ,PPARγ)配体激动剂罗格列酮(Rosiglita-zone,RSG)对气道平滑肌收缩作用的影响,为其是否能应用于哮喘的临床治疗提供新的理论依据。方法：1、雄性SD大鼠75只,采用随机数字表法将其分为正常组(A组)、哮喘组(B组)、RSG治疗组(C组),每组25只,制备各组大鼠的离体去上皮气管环分别为a、b、c组。2、哮喘大鼠模型的建立:第1d、第7d,B、C组大鼠腹腔注射10％的卵蛋白(ovalbumin, OVA)(10mg卵蛋白和100mg Al(OH)3溶解于1ml蒸馏水中)1ml致敏,A组给予等量蒸馏水腹腔注射。第14d-30d,B、C组大鼠用50ul的2mg?ml-1浓度OVA滴鼻,C组大鼠在滴鼻前用4mg·kg-1的盐酸罗格列酮片稀释于5ml生理盐水中灌胃治疗,B组大鼠用等量生理盐水灌胃,A组大鼠用等量生理盐水滴鼻和灌胃。3、末次激发后,每组取出5只大鼠肺组织HE染色,比较支气管粘膜和粘膜下嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润情况。4、末次激发后,测定三组大鼠的引喘潜伏期。5、将大鼠离体气管环置于37℃装有Krebs-Henseleit液和95％O2、5％CO2的浴槽中,通过张力换能器、生物放大器与生理记录仪相连,采用Chart软件采集记录气管环张力变化。(1)比较0.05mmol·L-1、0.5mmol·L-1、5mmol·L-1浓度梯度乙酰胆碱(Acetycholine ACh)激发下,三组大鼠离体气管环收缩张力大小。(2)比较0.01 mmol·L-1、0.1 mmol·L-1、1 mmol·L-1三种浓度RSG对ACh预收缩的a、b组离体气管环的舒张作用。(3)观察吲哚美辛、亚甲基蓝、普萘洛尔、左旋硝基精氨酸甲(NG-Nitro-Larginine Methyl Ester, Hydrochloride L-NAME)、伊比蝎毒素(Iberiotoxin IbTX)对RSG舒张a、b组气管环作用的影响。(4)观察0.01 mmol·L-1、0.1 mmol·L-1、1 mmol·L-1三种浓度RSG对a、b组离体气管环的ACh量效曲线的影响。结果:1、肺组织HE染色,b组支气管粘膜和粘膜下嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润较其余两组明显增高,差异有统计学意义(均P<0.05,n=20)。2、三组大鼠引喘潜伏期:B组0.05,n=20)。(3)吲哚美辛、L-NAME、亚甲基蓝,普萘洛尔不能阻断a组大鼠气管环RSG引起的舒张,差异无统计学意义,(均P>0.05,n=20);L-NAME能阻断b组RSG引起的舒张,IbTX对a组和b组RSG引起的舒张均有阻断作用,且对a组的阻断作用更强,其差异有统计学意义,(均P<0.05,n=20)。(4)三种浓度RSG使a、b组大鼠立体气管环ACh量效曲线明显右移。结论：RSG能减轻哮喘大鼠气道炎症细胞浸润;RSG能延长哮喘潜伏期;RSG能降低气道收缩张力;RSG对ACh预收缩的大鼠气管环可产生舒张作用,此作用可能与前列环素、胞浆可溶性鸟苷酸环化酶、β肾上腺素受体无关,而可能与大电导钙激活钾通道(Large-conductance calcium-activated potassium channels, BKCa)、一氧化氮(Nitric Oxide, NO)有关;RSG使ACh收缩气道平滑肌量效曲线右移。

目录

封面

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中文摘要

英文摘要

前 言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

3. 统计学分析

结 果

1 SD大鼠模型建立成功指标

2 SD大鼠引喘潜伏期的测定

3 离体气管环张力测定

讨 论

1. 支气管哮喘模型的建立

2. RSG对气道炎症和气道高反应性的影响

3. RSG对气道张力的影响

结 论

参考文献

致谢

综 述气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

1．Kca的分子结构和功能

2. AMSC上BKca的调节

3. IKca和AMSC增殖

4. SKca与AMSC

5. 展望

参考文献