db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与GLP-1的相关性研究

摘要

目的：研究db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与胰高血糖素样肽1（GLP–1）相关性，探索多形拟杆菌、产甲烷短杆菌对糖尿病影响的可能机制。
　　方法：用6周龄2型糖尿病模型组db/db(n=6)和对照组db/m(n=6)小鼠，观察第7周到第12周中两组小鼠的体重、空腹血糖水平；第12周之后，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法测定肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌的数量，其中以绝对与相对定量两种方式对多形拟杆菌进行检测，比较两种定量方式手段的差异；运用酶联免疫法（ELISA）测定门脉血和结肠组织匀浆液中GLP-1的水平来反映GLP-1的分泌，运用RT-qPCR和ELISA分别测定GLP-1R的表达，血清中C肽的水平来反映GLP-1的功能。
　　结果：
　　1.与对照组db/m相比，第7周到第12周的观察过程中模型组db/db小鼠体重增加（P＜0.01），空腹血糖升高（P＜0.01），并且出现血糖与粪样中多形拟杆菌呈正相关的变化。
　　2.与对照组db/m组相比，模型组db/db小鼠结肠中多形拟杆菌、产甲烷短杆菌的数量增加（P＜0.05），并且以绝对与相对定量两种方式对多形拟杆菌进行检测，没有统计学意义(P＞0.05)。
　　3.与对照组db/m组相比，模型组db/db小鼠门脉血、结肠组织匀浆液中GLP－1水平降低(P＜0.05)。
　　4.与db/m组相比，模型组db/db小鼠胰腺、结肠组织GLP-1R受体表达匀是下调(P＜0.05)和血清中C肽降低(P＜0.05)。
　　5.模型组db/db小鼠结肠内容物多形拟杆菌数量与门脉血、结肠GLP-1含量（r=－0.63, P＜0.01；r=－0.35, P＜0.01）和胰腺、结肠组织GLP-1R受体（r=－0.41, P＜0.01；r=－0.68, P＜0.01）表达呈负相关；产甲烷短杆菌数量与门脉血、结肠GLP-1含量（r=－0.17, P＜0.01;r=－0.46, P＜0.01）和胰腺、结肠组织GLP-1R受体（r=－0.27, P<0.01；r=－0.21, P＜0.01）表达呈负相关；
　　结论：肠道GLP-1的分泌和功能与多形拟杆菌、产甲烷短杆菌是相关的，可以提示肠道菌群的变化与2型糖尿病有关。

目录

封面

声明

中英文缩略词对照表

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 多形拟杆菌的形态

2 2型糖尿病模型组db/db和对照组db/m小鼠体重、血糖的变化

3 多形拟杆菌、产甲烷短杆菌数量的检测

4 GLP-1的分泌和功能的检测

5 门脉血、结肠匀浆液中LPS用酶联免疫法(ELISA)检测

6 多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与GLP-1相关性的分析

讨论

1 分子生物学技术在研究肠道微生物中的优势

2 动物选择

3 肠道菌群目标菌与2型糖尿病的关系

4 GLP-1分泌、功能与2型糖尿病的关系

5 多形拟杆菌和GLP-1的相关性在2型糖尿病中的可能机制

小结

致谢

参考文献

综述

攻读硕士学位期间发表的学位论文

导师评阅表