活性维生素D3对糖尿病肾病大鼠维生素D受体和肾脏纤维化因子的影响

摘要

目的:探讨活性维生素D3(vitamin D receptor，VDR)在糖尿病肾病(diabeticnephropathy，DN)中对维生素D受体及肾脏纤维化的作用及可能机制。
　　方法:遗过一次性腹腔注射链脲菌素(streptozotocin，STZ)诱导建立DN大鼠模型。用肾脏原位注射的方法，注射不同类型TGF-β1慢病毒，建立肾脏不同TGF-β1表达的动物模型。DN大鼠(n=36)分为6组:①TGF-β1过表达+花生油组6只;②TGF-β1过表达+维生素D组6只;③干扰TGF-β1+花生油组6只，④干扰TGF-β1表达+花生油组6只;⑤空载体慢病毒+花生油组6只，⑥空载体慢病毒+维生素D组6只。分别给予活性维生素D3或花生油（对照）灌胃37天，后全部处死取肾脏组织。用电镜及光镜观察各组肾脏组织形态变化;实时荧光定量PCR(real-time PCR)及western蛋白印迹实验检测各组转化生长因子-β1(transforming growth factor，TGF-β1)、维生素D受体(vitaminD receptor，VDR)、单核细胞趋化因子(moynocte chemoattractantprotein-1，MCP-1)、胶原蛋白-l(collagen-1，Col-1) mRNA及蛋白表达量的变化。
　　结果:(1)不同类型TGF-β1慢病毒可使肾脏有不同TGF-β1表达水平;即TGF-β1过表达病毒（TGF-β1高表达），干扰TGF-β1病毒（TGF-β1低表达），空载体病毒（TGF-β1正常表达）。(2)肾脏组织用电镜、马森染色及免疫组化光镜检查结果显示，TGF-β1 mRNA及蛋白表达量越高，肾脏病理变化越严重;活性维生素D3干预后肾脏纤维化减轻。(3)实时荧光定量PCR及western蛋白印迹检测提示:与空病毒+花生油组对比，过表达十花生油组TGF-β1、MCP-1、Col-1 mRNA及蛋白表达水平明显上调，VDR表达水平明显下调（均P＜0.05）;干扰+花生油组TGF-β1、MCP-1、Col-1表达水平明显下调，VDR表达水平明显上调（均P＜0.05）。(4)给予活性维生素D3干预的各组，与对应的花生油组比较，TGF-1、MCP-1、Col-1 mRNA及蛋白的表达水平均减少，VDR表达水平增加。
　　结论:活性维生素D3可能通过上调VDR，下调纤维化因子TGF-β1、MCP-1、Col-1的表达，起到防止纤维化发生的作用;在不同TGF-β1表达状态下，活性维生素D3仍能通过调节上述因子发挥肾脏保护作用。

目录

声明

中英文缩略词对照表

摘要

前言

1 研究内容

1．1 研究对象

1．2 实验仪器和试剂

2 方法

2．1 大鼠糖尿病肾病模型的建立

2．2 动物分组

2．3 标本收集

2．4 实验观察指标及方法

2．5 技术路线图

2．6 统计学处理

结果

讨论

小结

致谢

参考文献

综述 活性维生素D3及其受体对糖尿病肾病的影响

附录

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