同步推量调强放疗制作肢体软组织肉瘤安全外科边界的研究

摘要

目的：建立术前同步推量调强放疗（SIB-IMRT）技术制作肢体软组织肉瘤（STS）安全外科边界的方法。评价该方法的近期临床疗效和不良反应。了解SIB-IMRT对肢体STS外科边界组织形态、肿瘤细胞增殖与凋亡、微血管密度及其调控的影响，评价SIB-IMRT技术制作肢体STS外科边界的有效性。
　　方法：⑴收集我科于2012年1月至2015年1月间收治的局部晚期肢体STS患者32例。应用SIB-IMRT技术制作肢体STS外科边界。放疗计划：GTVs（外科边界靶区）3.5Gy/次，PTV（计划靶区）3.0Gy/次，5-7野，1次/天，共13次，5次/周，3周完成；放疗结束后3-6周行手术切除。术前同步化疗两周期，术后辅助化疗4-6周期。通过自身配对资料秩和检验比较放疗前后肢体周径变化；根据RECIST标准评价疗效；评价术后切缘情况；运用序贯试验设计评价术后6个月内无复发生存情况及外科边界区肿瘤坏死率；依据CTCAE4.0和 RTOG/EORTC标准评价放疗后不良反应。⑵调取上述患者SIB-IMRT前后外科边界组织蜡块，自身配对。制作HE染色切片、Masson染色切片、PTAH染色切片，观察SIB-IMRT后外科边界区组织形态变化；采用免疫组织化学法（IHC）定量检测SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞Ki-67、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达；采用TUNEL法测定SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞凋亡情况；采用RNA原位分子杂交法（RISH）定量检测SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA的表达；采用荧光原位杂交技术（FISH）定量检测SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞Bcl-2基因扩增情况。⑶采用IHC法检测SIB-IMRT前后外科边界组织CD34、CD105的表达，比较SIB-IMRT前后外科边界肿瘤微血管密度（MVD）的差异；采用IHC法定量检测外科边界区肿瘤细胞VEGF和HIF-1α蛋白的表达，比较其SIB-IMRT前后的差异；分析HIF-1α、VEGF蛋白和 MVD的相关性；比较临床分期对 SIB-IMRT前后HIF-1α、VEGF和MVD的影响。
　　结果：①SIB-IMRT技术制作局部晚期肢体STS外科边界的放疗计划可行。SIB-IMRT前后肢体周径差异有统计学意义（Z=-4.470， P＜0.05）；SIB-IMRT后部分缓解（PR）14例，病灶稳定（SD）18例；随访12-36个月，4例肺转移，4例死亡，6例复发，复发率18.7％；术后无复发生存时间5-32个月，无复发中位生存时间15个月；SIB-IMRT技术制作外科边界有效率＞60%；外科边界区肿瘤坏死率＞肿瘤坏死率；急性放射性皮肤损伤1级26例，2级4例，3级2例。皮肤晚期毒性1级29例，2级3例；皮下组织晚期毒性1级31例，2级1例。骨晚期毒性：0级27例，1级5例；关节晚期毒性：0级30例，1级2例。②HE染色切片、Masson染色、PTAH染色显示SIB-IMRT后外科边界区肿瘤细胞明显减少，坏死增多，纤维组织增生，假包膜增厚，横纹肌变性；SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞Ki-67蛋白、Bcl-2蛋白、Caspase-3蛋白的表达差异有统计学意义（t值=6.160，P＜0.05；t值=4.828，P＜0.05；t值=-5.335，P＜0.05）；SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞凋亡指数（AI）差异有统计学意义（t值=-3.590，P＜0.05）；SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA的表达差异有统计学意义（t值=3.452，P＜0.05；t值=-3.611，P＜0.05）；SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞 Bcl-2基因扩增差异有统计学意义（t值=3.893，P＜0.05）。③SIB-IMRT前后外科边界区以CD34标记肿瘤MVD差异有统计学意义（t值=3.589， P＜0.05）；以 CD105标记肿瘤 MVD差异有统计学意义（t值=2.539，P＜0.05）；SIB-IMRT前后外科边界区肿瘤细胞VEGF蛋白、HIF-1α蛋白的表达差异有统计学意义（t值=5.301，P＜0.05；t值=3.198，P＜0.05）。
　　结论：⑴SIB-IMRT技术制作局部晚期肢体 STS外科边界对提高 R0切除率具有重要意义，可改善无复发生存时间，近期疗效确切，缩短术前放疗疗程，患者耐受性较好。该技术制作局部晚期肢体STS外科边界是安全、有效的。⑵SIB-IMRT可使肢体STS外科边界区肿瘤实质细胞减少、纤维间质增生、假包膜增厚，便于手术切除。SIB-IMRT可使肢体STS外科边界区肿瘤细胞Ki-67蛋白、Bcl-2蛋白、Bcl-2 mRNA表达降低，Caspase-3蛋白、Caspase-3 mRNA表达升高，从而诱导STS细胞凋亡，抑制STS细胞增殖。⑶SIB-IMRT可使肢体STS外科边界区肿瘤细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达降低，抑制肿瘤微血管生成，可能会减少术前放疗待手术期转移风险。MVD与HIF-1α和VEGF蛋白表达相关，VEGF、HIF-1α蛋白和MVD可能是SIB-IMRT技术制作局部晚期肢体STS外科边界的疗效评价指标和预后因素。

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中文摘要

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前言

1 研究背景及意义

2 国内外研究现状及发展动态分析

第一部分 术前SIB-IMRT制作肢体软组织肉瘤外科边界的临床应用研究

1 研究内容与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第二部分 SIB-IMRT对肢体STS外科边界组织形态及肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

1 研究内容和方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第三部分 SIB-IMRT对肢体STS外科边界肿瘤微血管密度及其调控的影响

1 研究内容和方法

2 结果

3 讨论

4 小结

结论

致谢

参考文献

附录1：

附2：肢体软组织肉瘤患者术前SIB-IMRT知情同意书

综述: 软组织肉瘤调强放疗和外科边界的研究现状

攻读博士学位期间获得的学术成果

个人简历

新疆医科大学博士研究生学位论文导师评阅表