奶牛脐带间充质干细胞通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路调控奶牛乳腺上皮细胞生理功能的研究

摘要

本研究拟在前期试验的基础上，以乳腺上皮细胞为细胞模型，利用PI3K抑制剂LY294002和mTOR抑制剂RAPA对PI3K/AKT/mTOR信号通路中两个非常关键的调控节点PI3K和mTOR信号分子进行了抑制干扰，探讨UC-MSCs通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控BMECs细胞增殖、凋亡、细胞周期、分泌等生理功能，旨在为UC-MSCs促进BMECs细胞增殖、抑制BMECs细胞凋亡、改变BMECs细胞周期的作用机理，尤其是提高BMECs分泌能力的机制方面提供更为详实的实验数据。
　　结果显示:将UC-MSCs与BMECs这两种细胞共培养，能够明显激活PI3K信号通路增加其上下游信号分子的表达量。在孵育BMECs细胞环境中添加mTOR的抑制剂RAPA以及PI3K的抑制剂LY294002，极显著的抑制了BMECs的增殖、促进了BMECs凋亡，影响BMECs细胞周期，削弱了BMECs分泌性能，减少了PI3K信号通路的上、下游信号分子表达，然而与UC-MSCs细胞共培养后，这种抑制作用明显获得抵消。
　　本试验研究得出以下结论:
　　(1)UC-MSCs和BMECs按照1∶2浓度比混合共培养能够促进BMECs细胞增殖、抑制BMECs细胞凋亡、影响BMECs细胞周期、促进BMECs细胞分泌能力、提高GLUT1的表达量。
　　(2)PI3K/AKT/mTOR信号通路参与调控BMECs细胞的增殖、凋亡、细胞周期、分泌能力和GLUT1表达量。
　　(3)抑制剂LY294002和RAPA通过阻断PI3K/AKT/mTOR通路抑制BMECs细胞增殖、促进BMECs细胞凋亡、影响BMECs细胞周期、抑制BMECs细胞分泌能力、降低GLUT1表达量。
　　(4)抑制剂LY294002和RAPA能够抑制PI3K/AKT/mTOR通路上、下游信号分子表达。
　　(5)UC-MSCs能够激活被阻断的PI3K/AKT/mTOR信号通路，使其重新参与调控BMECs细胞。
　　(6)UC-MSCs通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路调控BMECs细胞增殖、凋亡、细胞周期、分泌能力和GLUT1表达。

目录

声明

论文说明

摘要

缩写词中英文对照表

第1章 绪论

1．1 PI3K／AKT／mTOR信号通路的基本结构组成

1．2 PI3K／AKT／mTOR信号通路抑制剂

1．3 PI3K／AKT／mTORR信号通路的生物学功能

1．4 PI3K／AKT／mTOR信号通路的国内外研究进展

1．5 间充质干细胞生物学功能概况

1．6 本文的研究目的与意义

1．7 技术路线图

第2章 奶牛脐带间充质干细胞通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控奶牛乳腺上皮细胞生理功能的研究

2．1 试验一 UC-MSCs通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控共培养体系细胞增殖

2．2 试验二 UC-MSCs通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控共培养体系细胞凋亡的研究

2．2 试验三 UC-MSCs通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控BMECs细胞周期

2．4 试验四 UC-MSCs通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控BMECs分泌性能的研究

2．5 试验五UC-MSCs和BMECs共培养对PI3K／AKT／mTOR上、下游信号分子mRNA表达量的影响

2．6 试验六UC-MSCs通过激活PI3K／AKT／mTOR信号通路调控BMECs细胞中GLUT1表达的研究

第3章 结论

第4章 问题与展望

4．1 问题

4．2 展望

参考文献

附录

附图

致谢

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