转Bt基因海岛棉抗虫性鉴定及新品系筛选

摘要

海岛棉作为新疆特有的资源，其优良的纤维品质和商业价值是其他作物不可替代的。本研究以K222、新海25、新海30为受体，利用农杆菌介导技术导入Bt基因，通过PCR检测、Southern杂交、Bt-CrylAb/1Ac试纸条检测和抗虫性鉴定，证明Bt基因整合到海岛棉基因组中并得到表达。在分子检测基础上，对转Bt基因海岛棉品系的农艺性状、产量性状和纤维品质进行考察，结果表明:
　　(1)PCR检测结果得出9个转Bt基因品系都含有目的基因，并且阳性率都在90％以上;Southern杂交结果可以看出7个转Bt基因品系出现了杂交条带，3个品系为单拷贝，3个品系为双拷贝，1个品系三拷贝。表明Bt基因已经成功整合到海岛棉基因组中。
　　(2)用Bt免疫试纸条检测转Bt基因品系及对照，转Bt基因品系的试纸条上出现两条紫红色条带，而对照的试纸条上只出现一条紫红色条带，K2-ZKC66的阳性率达到了90％。
　　(3)抗虫性鉴定结果表明转Bt基因品系的叶片危害较轻，叶片较为完整，对照叶片危害较重，叶片不完整，7个转Bt基因抗虫棉幼虫校正死亡率都在60％以上。
　　(4)Bt基因的导入对9个海岛棉品系的农艺性状、产量性状和纤维品质产生不同程度的变化，当受体为K222时，转基因品系农艺性状（除果枝数外）与对照之间差异极显著(P＜0.01);当受体为XH25和XH30时，转基因品系农艺性状与对照之间差异不显著。
　　(5)9个转基因品系之间株高、始节高、始节数和铃数差异极显著(P＜0.01)，有效果枝数和有效铃数差异显著(P＜0.05)。
　　(6)9个转基因品系的产量性状与对照之间差异不显著;农艺性状与产量呈显著相关。
　　(7)综合考虑9个转Bt基因抗虫棉在各方面的表现，筛选出K2-ZKC66，K2-ZKC31，K2-ZKC70三个表现优良的新品系。

目录

声明

论文说明

摘要

缩略词表

第1章 绪论

1．1 引言

1．2 转Bt基因棉花的研究现状

1．2．1 国外转Bt基因棉花研究现状

1．2．2 国内转Bt基因棉花研究现状

1．3 棉花转基因的常用方法

1．3．1 农杆菌介导法

1．3．2 花粉管通道法

1．3．3 基因枪轰击法

1．4 转Bt基因棉花的检测方法

1．4．1 Bt试纸条检测

1．4．2 抗虫性鉴定

1．4．3 PCR检测

1．4．4 Southern杂交

1．5 转Bt基因棉农艺性状的改变

1．6 本研究的目的和意义

第2章 转Bt基因海岛棉分子检测及抗虫性鉴定

2．1 材料与方法

2．1．1 试验材料

2．1．2 主要试剂和仪器

2．1．3 试验方法

2．2 结果与分析

2．2．1 转Bt基因品系的分猢I结果分析

2．2．2 Bt-Cry1Ab／1Ac试纸条检测结果分析

2．2．3 转Bt基因品系抗虫性检测结果分析

2．3 讨论

第3章 不同转基因海岛棉品系间农艺及产量性状的比较

3．1 材料和方法

3．1．1 试验材料

3．1．2 试验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 农艺性状的比较分析

3．2．2 产量性状的比较分析

3．2．3 转基因品系农艺性状及产量性状相关分析

3．2．4 纤维品质的比较分析

3．3 讨论

3．3．1 转Bt基因海岛棉农艺及产量性状与对照的差异分析

3．3．2 Bt基因导入不同受体对农艺性状的改变

3．3．3 转基因品系农艺性状对产量的影响

3．3．4 转基因品系纤维品质的改变

第4章 结论及展望

4．1 结论

4．2 展望

参考文献

致谢

作者简介