HPV16E7及HLA-DQB1基因多态性与新疆维吾尔族宫颈癌关系研究

摘要

目的：研究新疆维吾尔族妇女HPV16阳性子宫颈癌组织HPV16E7基因突变情况及子宫颈癌细胞表面HLA-DQB1基因多态性与新疆维吾尔族妇女子宫颈癌关系。
　　 方 法：（1）采用聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR）方法对160例（子宫颈癌组80例，宫颈炎组80例）新疆维吾尔族妇女宫颈组织标本进行HPV16 E7基因扩增，电泳PCR产物确定扩增产物是否为E7片段，回收PCR产物并进行碱基测序。（2）采用反向膜杂交技术对80例宫颈鳞癌组织标本进行HPV分型。（3）运用聚合酶链反应-直接测序分型（Polymerase chain reaction-Sequencing Based Typing，PCR-SBT）扩增宫颈鳞癌及宫颈炎组织中HLA-DQB1第二外显子，回收扩增产物并进行碱基序列测定分型。
　　 结 果：（1）54例宫颈鳞癌中共有6例发生HPV16 E7碱基突变，突变位点为：A647G（2/54）,T760C（2/54）,G663A（1/54）,G666A（1/54）,C790T（1/54）,T846C（1/54），其中A647G（2/54）及C790T（1/54）为错义突变，分别导致第29位氨基由天冬酰胺变为丝氨酸及第77位氨基由精氨酸变为半胱氨酸。宫颈炎组中有2例HPV16 E7 PCR扩增阳性，测序未发现突变。（2）160个样本中共检测出296个等位基因，其中杂合的等位基因型136人份，纯合的等位基因型24人份。经过频率计算和统计分析发现HLA-DQB1*0325（OR:10.60,1.341-83.81)HLA-DQB1*0332(OR:12.59, 2.909-54.526)在新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌中频率明显高于宫颈炎对照组(p<0.05)，而HLA-DQB1*0317(OR:0.49 ,0.304-0.798)和HLA-DQB1*040302（OR:0.40,0.243-0.658)明显低于宫颈炎对照组(p<0.05)。（3）在80例宫颈鳞癌分型检测中，共检出15种高危型HPV(分别为HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,53,73)，2种低危型HPV(分别为HPV11,42)，其中HPV16单一感染33例，占44%；HPV16合并其他高危型感染20例，占26%，合并高危型感染的型别中以56型为主，占14例（70%），其次为33型、58型；HPV16合并其他低危型感染7例。80例子宫颈癌中有HPV16型感染的为62例，感染率为77.5%。在混合感染中以双重感染为多，其次为三重感染，发现1例为五重感染。
　　 结 论：（1）新疆维吾尔族妇女子宫颈癌中HPV感染以HPV16感染率最高，其次为HPV56，而HPV18型较少，且重复感染相对较多，与我国其他地区以HPV16、18型为主有差异，这为HPV疫苗在新疆维吾尔族聚集地区的开发提供一定的理论依据。（2）新疆维吾尔族妇女子宫颈癌HPV16 E7相对于我国其他地区、民族子宫颈癌具有高度保守性，这可能是导致新疆维吾尔族聚集区子宫颈癌高发的重要原因之一。（3）HLA-DQB1*0325和HLA-DQB1*0332可能是新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的易感基因，而HLA-DQB1*0317和HLA-DQB1*040302可能为新疆维吾尔族妇女子宫颈癌的保护基因。（4）HPV16 E7变异位点未发现DQ2抗原结合位点突变，这说明可能E7的变异并不是导致HLA抗原提呈能力下降的原因，某些HLA等位基因频率的升高和降低可能导致了HLA抗原提呈能力下降，这可能是新疆维吾尔族妇女子宫颈癌高发重要原因之一。

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文 献 综 述:HPV及HLA与宫颈癌关系研究进展

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