新疆加工番茄细菌性病害的鉴定、品种抗病性及快速检测技术的研究

摘要

新疆是我国最大的番茄种植基地，常年种植面积占全国90％以上。随着种植面积的扩大和连作重茬现象的不断发生，番茄细菌性病害发生日趋严重，时有新病害或新问题出现。因此，作者再次对新疆加工番茄细菌性病害进行了比较系统的研究。
　　2010年对新疆石河子、奎屯地区加工番茄田间出现了茎杆爆裂、植株萎蔫和果实出现“鸟眼斑”的病原菌进行了致病性、形态学、培养特性、生理生化反应测定、16SrDNA序列分析及番茄溃疡病菌特异性引物的PCR检测，确定其病原为密执安棒形杆菌密执安亚种（Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis，简写Cmm）。同时在石河子地区加工番茄田间还发现一种导致根、茎维管束变色且整株枯死的细菌性病害，利用上述同样的方法对其鉴定，确定其为Peudomonassyringaepv.tomato（简写为Pst），首次在国内发现Pst可以侵染番茄维管束组织，其致病性明显强于一般番茄细菌性斑点病菌株。
　　利用针刺方法研究了30个加工番茄品种幼苗对番茄细菌性溃疡病的抗病情况，结果显示，供试品种中没有抗病或耐病品种，只有4个表现为中度感病，其余全部为高感品种。
　　利用喷雾方法研究了32个加工番茄品种分别对Pst20（番茄叶片上分离）和Pst5（番茄维管束中分离）抗病性情况。结果显示，对于Pst20，不同品种间有明显差异，平均病指为69.55，但没有发现免疫和抗病品种，耐病品种有H5503，石番19，H8504，T737，石番28，石番33，石番29，石红401；屯河26，石番15，H9205，石番18，石番36为感病品种；剩余的19个品种均为高感品种；15d后进行剖杆检查，没有发现有维管束变褐的植株。对于Pst5菌株，喷雾接种后2d发现番茄植株下部叶片大量脱落，32个品种均表现为高感，平均病指为97.93，15d后进行剖杆检查，发现接种时剪掉老叶或有损伤的地方，病原菌可侵入髓部，使维管束变褐，发病率为8%。与从叶片上分离的菌株Pst20接种时产生的症状有些不同，从茎秆中分离的Pst5菌株的毒力要强。
　　通过对新疆不同地区番茄细菌性斑点菌株的致病性分化发现，不同地区的番茄细菌性斑点病菌株在形态特征、生理生化特性和寄主范围上没有明显的区别，但在番茄品种的致病性上存明显的分化现象。
　　通过Cmm特异性引物（Cmm-5和Cmm-6）PCR检测番茄溃疡病菌发现，所有供试菌株均扩增出一条614bp大小片段，与预期目标片段相一致；检测Cmm不同浓度的菌悬液发现，Derect-PCR的灵敏度为105CFU/mL。而利用特异性引物MM5R和MM5F检测Pst菌株都可得到一条500bp左右大小的片段，与预期目标片段614bp大小基本一致，其检测灵敏度为104CFU/mL，灵敏度较高。Derect-PCR可以检测番茄病组织，说明番茄叶片和茎杆中不含抑制PCR反应的化合物，但灵敏度受菌体数量及杂质等影响较大。

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第一章 文献综述

1.1 番茄细菌性病害的发生、分布及危害

1.2 番茄细菌性病害病原菌的致病性分化

1.3 番茄品种对主要细菌性病害的抗性鉴定

1.4 番茄细菌性主要病害的防治现状

1.5 植物病原细菌病原的鉴定与检测技术

1.6 本实验的目的

第二章 材料和方法

2.1 所用培养基

2.2 所用试剂

2.3 番茄细菌性溃疡病的研究

2.4 番茄细菌性斑点病的研究

2.5 快速检测技术

第三章 结果与分析

3.1 加工番茄细菌性溃疡病的研究

3.2 加工番茄细菌性斑点病的研究

3.3 快速检测技术3.3.1 Cmm的快速检测3.3.1.1 PCR灵敏度

第四章 结论和讨论

4.1 番茄细菌性溃疡病

4.2 番茄细菌性斑点病的研究

4.3 PCR快速检测技术

参考文献

致谢

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