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ADAMTS-4、ADAMTS-5在骨关节炎患者关节滑膜中的表达及意义

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前言

材料和方法

1 临床资料来源

2 实验仪器和试剂

2.1 仪器与试剂

2.2 溶液配制

3 技术路线图

4 研究方法

4.1 Western blot法

4.2 免疫组化方法

5 统计学处理

结果

1 Western blot方法检测结果

1.1 western blot的结果判定

1.2 western blot结果分析

2 免疫组化染色观察结果

2.1 免疫组化的结果判定

2.2 免疫组化结果分析

讨论

结论

参考文献

文献综述

致谢

作 者 简 介

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摘要

目的:骨关节炎(Osteoarthritis, OA)是膝关节最常见的疾病之一,虽然是一种膝关节慢性疾病,但随着病程进展,可以导致残疾,骨关节炎是一种慢性、渐进性、退行性关节病变,以关节软骨退化为主要特征,以关节周围疼痛及关节功能障碍为主要临床表现,其发生常由不同病因诱发,但在形态学、生物学和临床表现上有极为相似。根据流行病学调查结果显示,在过去的十年中全世界骨关节炎患者数量增加了百分之三十,而世界范围内五十岁以上人群中,骨关节炎的发病率大约是百分之五十,为了深入了解和研究骨关节炎的发病机制和治疗方法,本研究着重探讨ADAMTS-4和ADAMTS-5在骨关节炎患者滑膜中的表达及相关性。
  方法:收集石河子大学第一附属医院2012年3月~2013年3月在我科(骨一科)行膝关节镜、膝关节置换或下肢截肢手术的患者膝关节滑膜标本60例(实验组选择临床确诊为OA患者30例;对照组选择单纯膝关节半月板损伤、滑膜皱襞综合症或者截肢的患者30例),男性36例,女性24例,年龄为18-75岁,中位年龄为60岁,所有病例经本院骨科和影像学检查确诊(采用1995年美国风湿病学会关于OA的诊断标准),所有临床病例标本均在通过医院伦理委员会和患者本人同意后取材。应用Western blot法和免疫组化检测ADAMTS-4和ADAMTS-5在30例骨关节炎(OA,实验组)患者与30例对照组(非OA)滑膜组织中的表达情况。将实验所得的数据进行统计学分析采用SPSS17.0版软件,研究所得计数资料均采用卡方(χ2)检验并用x士s表示,两种蛋白的表达与OA的相关性及相关程度用Pearson积矩相关分析,r表示相关系数,P<0.05则定义为于统计学意义上有差异。
  结果:Western blot结果显示ADAMTS-4、ADAMTS-5蛋白在实验组患者滑膜中表达明显高于对照组患者,并且两种蛋白在 OA组中表达呈正相关性。免疫组化结果表明ADAMTS-4和ADAMTS-5蛋白在实验组与对照组患者滑膜中的表达有显著性差异(P<0.01),并且进一步发现阳性结果多表达定位于滑膜组织细胞的细胞质中。
  结论:骨关节炎的发生和发展与ADAMTS-4和ADAMTS-5蛋白密切相关,二者可能作为诊断及判断骨关节炎的一项重要指标。

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