北疆籽用西葫芦病毒病害调查及病毒种类鉴定和检测

摘要

籽用西葫芦种植是新疆极具发展潜力的新兴产业之一，已成为地区经济增长和当地农民增收的主要方式。病毒病在籽用西葫芦种植中普遍发生并造成严重的经济损失。本研究通过对北疆地区籽用西葫芦病毒病的调查及鉴定，为生产实践防治籽用西葫芦病毒病害提供理论依据。
　　对石河子等6个普遍发生籽用西葫芦病毒病害的地区进行田间症状及发病情况的初步调查，结果显示：籽用西葫芦病毒病始发期为6月下旬至7月中旬，盛发期为7月中旬至8月上旬，其中石河子大学教学试验场籽用西葫芦病毒病为6月下旬开始至7月上旬缓慢发展，7月中旬至下旬,快速发展,截止8月13日籽用西葫芦病毒病发病率达100％。所调查的6个籽用西葫芦种植区均有花叶型、黄化型、畸形、蕨叶型以及复合类型,但发病率及病情指数不同。说明籽用西葫芦病毒病症状类型大致相同，但不同地区发病程度有较大差异。
　　以采自新安镇等7个地区的121份籽用西葫芦病毒病疑似样品为研究对象，通过田间症状观察及 RT-PCR检测，结果表明：侵染籽用西葫芦的毒原主要有黄瓜花叶病毒(CMV)、小西葫芦黄瓜花叶病毒(ZYMV)、西瓜花叶病毒(WMV)和番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)，4种病毒的检出率为68.6%，95.0%，81.0%和28.1%；其中受2种及2种以上病毒复合侵染率达90.1%，主要以 ZYMV+CMV、ZYMV+WMV+PRSV-W、ZYMV+CMV+WMV+PRSV-W复合侵染为主。
　　为明确籽用西葫芦种子携带病毒的情况并筛选出有效脱除病毒的方法，以籽用西葫芦种子为材料，采用多重 PCR技术检测种子带毒率，并通过相对荧光定量分析8种不同温度下湿热和干热处理对种子病毒的钝化效果。结果表明，京丰等7个品种籽用西葫芦种子均可检测到CMV、ZYMV及WMV，其中CMV的检出率为67.1%，ZYMV的检出率为50.0%，WMV的检出率为72.3%，而病毒复合检出率为66.0%。；不同品种种子的病毒检出率有明显差异，其中粒丰9号种子的检出率最低为60%，而京丰9号、瑞丰9号、绿丰9号及金葫360的检出率均为100%。8种处理均能不同程度降低籽用西葫芦种子的带毒率，其中干热60℃，70℃，湿热75℃处理时，脱除WMV, CMV和ZYMV的效果最好。

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引言

第一章 文献综述

1.1 国内外葫芦科作物主要病毒病研究

1.2 不同检测技术在葫芦科病毒病中的应用

1.3 本研究的目的及意义

第二章 石河子地区籽用西葫病毒病害发生情况的调查

2.1 调查地点

2.2 方法

2.3 结果与分析

2.4 结论

2.5 讨论

第三章 籽用西葫芦病毒病原种类的分子鉴定与检测

3.1材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 结论

3.4 讨论

第四章 多重PCR检测籽用西葫芦种子病毒及热处理脱毒效果分析

4.1材料和方法

4.2 结果与分析

4.3 结论

4.4 讨论

第五章 全文小结

参考文献

附录 A 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器

附录B：常用培养基及缓冲液配方

致谢

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