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子痫前期胎盘组织差异表达基因的克隆和初步鉴定

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论文说明:缩略语

前言

第一部分:差异表达基因的筛选和克隆

材料和方法

结果

第二部分:差异表达基因的序列测定和分析

材料和方法

结果

一、测序结果

二、与数据库同源序列比对1

二、与数据库同源序列比对2

第三部分:差异表达基因的初步鉴定

材料和方法

结果

讨论

结论

测序图

致谢

参考文献

综述 MRNA差异显示技术在妇产科领域的应用

参考文献

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摘要

痫前期的易感基因并研究其表达情况成为当前研究本病的重点。本研究应用荧光mRNA差异显示技术筛选子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织差异表达的基因,并进行克隆及初步鉴定,进一步探讨子痫前期发生发展的分子机制,为其遗传学和易感基因的研究提供新的思路。经过实验研究,得出以下结论:1、本研究首次应用荧光差异显示方法研究子痫前期患者胎盘差异表达的基因,筛选并分离出部分子痫前期相关的基因片段。2、通过克隆和测序发现6个新的基因表达片段,并申请获得新GenBank登录号。发现11个与已知基因高度同源的基因片段,对进一步了解这些基因的功能及其在子痫前期中的作用均有重要意义。3、通过Northern印迹杂交、半定量RT-PCR及免疫组化验证新基因片段的表达,确定其表达规律,排除假阳性。4、重度子痫前期患者胎盘组织PP2ACβmRNA及PP2A蛋白水平的表达均显著高于正常,PP2A可能通过促进胎盘滋养层细胞的凋亡及阻碍血管生成而参与子痫前期的发病。5、ABCG2在胎盘屏障中起重要作用,在重度子痫前期患者胎盘组织中mRNA的表达水平增高可能与临床用药及机体氧化应激有关。

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