表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒的构建及抗肿瘤作用的实验研究

摘要

本文主要进行了 表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒的构建及抗肿瘤作用的实验研究，分为两部分完成。第一部分构建表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒并鉴定其在肿瘤细胞的表达。第二部分重点介绍了表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒抗肿瘤作用的实验研究，以探讨表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒的抗肿瘤作用。经研究发现，表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒可有效结合TGF-β1，显著逆转TGF-β介导的免疫抑制状态；高水平表达RANTES，强化肿瘤局部的免疫功能，共同提高机体抗肿瘤的免疫反应，抑制肿瘤生长，诱导细胞凋亡，延长生存时间，具有显著的抗肿瘤作用。

目录

论文说明：缩略语

摘要

研究总体思路

第一部分：表达分泌型sTβRⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒的构建与鉴定

前言

材料和方法

一材料与仪器

二、方法

二、方法（一）小鼠TβRⅡ胞外区和RANTES基因的扩增

二、方法（二）目的基因（TβRⅡ胞外区、RANTES）连入T-easy载体

二、方法（三）重组质粒的放增与鉴定

二、方法（四）以测序正确的重组质粒为模板扩增目的基因

二、方法（五）重叠PCR扩增融合基因sTβRⅡ胞外区-RANTES

二、方法（六）纯化重叠PCR获得的融合基因sTβRⅡ胞外区-RANTES，连入T-easy载体、扩增并测序鉴定

二、方法（七）重组腺病毒载体构建及腺病毒扩增

二、方法（八）重组腺病毒的转染

二、方法（九）Westen Blot鉴定

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分：表达分泌型sT β RⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒抗肿瘤作用的实验研究

前言

材料和方法

结果

讨论

一、细胞因子基因治疗

二、TGF-β的信号通路及其对肿瘤作用的多样性

三、RANTES强化免疫功能的作用

四、分泌型sT β RⅡ胞外区-RANTES融合基因重组腺病毒的抗肿瘤作用

小结

参考文献

综述TGF-β及其受体与肿瘤的研究进展

参考文献

致谢