孕妇尿液中邻苯二甲酸酯含量与胎盘基因表达关系研究

摘要

目的：使用液质联用法检测天津某医院孕妇尿中四种邻苯二甲酸酯代谢产物含量，评估孕妇人群暴露水平，初步分析生活方式对邻苯二甲酸酯暴露水平的影响，检测孕妇胎盘中三种睾酮合成相关的三种基因的表达量，并分析其表达量与邻苯二甲酸酯代谢产物含量是否存在关联，为邻苯二甲酸酯对人体毒作用提供依据。
　　方法：收集天津某医院90名孕妇入院后分娩前尿液，自制问卷调查孕妇孕期生活方式，跟踪随访其分娩，收集胎盘组织样本；应用固相萃取-高效液相色谱串联质谱法检测孕妇尿中四种邻苯二甲酸单酯的含量；使用二分类Logistic回归模型分析每种邻苯二甲酸单酯含量较高组与较低组生活方式是否存在差异；应用实时定量PCR技术检测孕妇胎盘中三种性激素合成相关基因CYP11A1、P450C17、3beta-HSD的表达水平，使用Pearson相关分析对数转换后的四种邻苯二甲酸单酯水平与三种基因的表达量间是否存在相关关系。
　　结果：
　　1.90名孕妇尿中邻苯二甲酸单甲酯检出率为98.21％，肌酐校正后的含量中位数为67.07ug/g；邻苯二甲酸单乙酯检出率98.21％，含量中位数31.97ug/g；邻苯二甲酸单丁酯检出率85.71％，含量中位数16.85ug/g；邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯检出率98.21％，含量中位数47.76ug/g；二分类Logistic回归发现住房两年内曾装修可能是孕妇尿中高邻苯二甲酸单丁酯含量较高的风险因素，尚未发现其他生活方式相关因素在邻苯二甲酸酯含量较高组与正常组存在统计学差异。
　　2.90例胎盘组织提取总RNA后，逆转录为cDNA，绝对定量法计算三种基因转录水平的中位数分别3betaHSD(6.892×104)，CYP11A1(3.825×104)，P450C17(1.878×104)，对数转换后的MMP与CYP11A1、3b-HSD有相关关系，相关系数与P值为0.356、0.001和0.295、0.004；MEP与CYP11A1存在相关关系，相关系数与P值为0.240和0.030；将邻苯二甲酸酯含量分段后发现，五分位数3浓度的MMP与CYP11A1负相关，相关系数与P值为-0.565和0.012；五分位数5的MBP与3b-HSD相关，相关系数与P值为0.470和0.042；五分位数5的MEHP与CYP11A1负相关，相关系数与P值为-0.665和0.005、与3b-HSD负相关，相关系数与P值为-0.524和0.026。
　　结论：本研究应用分离效果良好，定性准确，定量准确的SPE-LC-MS技术检测天津地区孕妇尿液中PAEs含量，发现与国外相关研究相比，本地区孕妇尿中PAEs检出率较高且部分邻苯二甲酸酯代谢产物含量偏高，提示孕妇PAEs暴露情况较为严重，应给予干预；应用统计分析发现住房近两年是否曾装修在MBP含量较高组和正常组分布不同，提示住房装修造成的室内空气污染可能是人群暴露PAEs的重要来源之一；本研究发现孕妇尿中中等浓度的MMP、高浓度的MEHP与睾酮生成相关基因存在负相关关系，提示邻苯二甲酸酯代谢产物可能通过降低睾酮生成相关基因的表达而阻碍睾酮的生成，扰乱人体内分泌功能。