E2F3在激烈抵抗型前列腺癌进展中的作用

摘要

研究目的：明确转录因子E2F3在前列腺癌雄激素依赖性细胞系(LNCAP)和雄激素非依赖性细胞系(C4-2，PC-3，DU145)中的表达，明确E2F3在激素抵抗型前列腺癌进展中的作用，探索激素抵抗型前列腺癌进展机制
　　研究方法：采用Westernblot检测前列腺癌雄激素依赖性细胞系(LNCAP)和前列腺癌雄激素非依赖性细胞系(C4-2，PC-3，DU145)E2F3蛋白表达；采用质粒pcDNA3.1-HA-E2F3-GFP转染LNCAP细胞，提高LNCAP细胞中E2F3蛋白表达水平，并帅选出稳定高表达E2F3蛋白的重组LNCAP-E2F3细胞系；将LNCAP-E2F3细胞系和LNCAP细胞系分别采用去雄激素培养基培养，96h后进行MTT检测细胞相对活力，流式细胞检测细胞凋亡情况。
　　研究结果：1.各组细胞系中E2F3蛋白表达有差异，LNCAP，C4-2，PC-3，DU145组E2F3蛋白相对灰度值分别为1.1095±0.0113，2.0492±0.0192，2.4395±0.0854，2.7095±0.0501；LNCAP细胞系E2F3蛋白表达较C4-2细胞系约减少了0.9397，较PC-3细胞系约减少1.33，较DU145细胞系约减少1.6，p<0.05，差异均具有统计学意义。
　　2.质粒pcDNA3.1-HA-E2F3-GFP高效转染LNCAP细胞，并成功的构建高表达E2F3蛋白的LNCAP-E2F3细胞系，LNCAP-E2F3细胞系中E2F3的相对表达量为1.8509±0.0849，LNCAP细胞系中E2F3蛋白相对表达量为1.1014±0.027，p<0.05，差异具有统计学意义。
　　3.LNCAP-E2F3组细胞，空质粒组细胞，无处理组细胞分别经去雄激素培养基培养96h后细胞存活率分别为0.804±0.013，0.807±0.0150，1.593±0.031。雄激素剥夺后LNCA-E2F3细胞存活率较无处理组，空质粒组细胞明显增加，P<0.01差异有统计学意义。
　　4.LNCAP-E2F3组细胞，空质粒组细胞，无处理组细胞分别经去雄激素培养基培养72h后，细胞凋亡率分别为(24.47±1.10)％，(47.46±0.60)％，(45.56±0.61)％，无处理与空质粒组LNCAP细胞凋亡率相比P=0.22，差异无统计学意义。LNCAP-E2F3组与空质粒组相比凋亡减少23.0％，P<0.01，两者差异具有统计学意义；LNCAP-E2F3组与无处理组相比凋亡减少22.1％，P<0.01两者相比差异具有统计学意义
　　结论：E2F3在前列腺癌雄激素非依赖细胞系中高表达，E2F3在激素抵抗型前列腺癌进展中起到重要作用，E2F3有希望成为研究前列腺癌进展阶段的重要靶标，并为控制晚期前列腺癌的进展提供治疗新途径。