Hhcy、ADMA致大鼠脑血管损伤及干预治疗研究

摘要

目的:探讨高同型半胱氨酸血症(Hhcy)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对大鼠脑血管结构和功能的影响;并在此基础上给予普罗布考、叶酸及维生素B12干预，观察大鼠血浆Hcy、ADMA、OX-LDL、DDAH指标变化情况，评价干预的效果。
　　 方法:70只SD雄性大鼠随机分为7组，每组10只:正常对照(A)组、Hhcy模型(B)组、低、中、高剂量普罗布考(C、D、E)组、叶酸+维生素B12(F)组、叶酸+维生素B12+中剂量普罗布考(G)组。A组给予普通饲料喂养12周，其他六组给予2％蛋氨酸饲料喂养12周，自第9周初起分别给予蒸馏水、不同剂量普罗布考(340mg/kg/d，510mg/kg/d，680mg/kg/d)、叶酸、维生素B12等不同干预措施灌胃4周。分别于实验开始、第8、12周末测定大鼠血浆Hcy、ADMA、OX-LDL水平;于第12周末测定大鼠脑组织DDAH2蛋白表达。ADMA、Hcy的测定采用高效液相色谱分析法，OX-LDL的测定采用酶联免疫分析法，DDAH2的测定采用Wersternblot法。于第12周末电镜下观察大鼠脑血管及周围脑组织的结构改变。
　　 结果:
　　 1.实验开始时，七组大鼠血浆Hcy、ADMA、OX-LDL等指标均无统计学差异（P＞0.05）。采用高蛋氨酸饲料喂养大鼠8周可完全诱导Hhcy模型，B组大鼠血浆Hcy水平可由实验开始时的6.39±1.51μmol/l上升至实验第8周末时的60.42±11.92μmol/l，同时伴有ADMA、OX-LDL水平升高，与同时期A组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　 2.第8周及12周末B组大鼠血浆Hcy水平均高于同时期A组（P＜0.01）。第12周末，C、D、E组大鼠血浆Hcy水平均低于同时期B组(P＜0.05），但仍高于A组(P＜0.01)，亦高于F及G组(P＜0.05);F组大鼠血浆Hcy水平均低于同时期B组(P＜0.01)，高于A组及G组（P＜0.05）;G组血浆Hcy水平与同时期A组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 3.第8周及12周末B组大鼠血浆ADMA水平均高于同时期A组(P＜0.01)。第12周末，C、D、E组及F组大鼠血浆ADMA水平均低于同时期B组(P＜0.05)，但仍高于A组，亦高于G组(P＜0.05);此四组间ADMA水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05）;G组血浆ADMA水平与同时期A相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 4.第8周及12周末B组大鼠血浆OX-LDL水平均高于同时期A组(P＜0.01)。第12周末，C、D、E组及F组血浆OX-LDL水平均低于同时期B组(P＜0.05），但仍高于A组，亦高于G组(P＜0.05)，此四组间OX-LDL水平差异无统计学意义（P＞0.05）;G组大鼠血浆OX-LDL水平与同时期A组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 5.第12周末C、D、E、F组大鼠血浆Hcy、ADMA及OX-LDL水平均较第8周末减低，但仍高于实验开始时，差别均有统计学意义(P＜0.05);G组血浆Hcy、ADMA及OX-LDL水平较第8周末减低，差别均有统计学意义(P＜0.05);与实验开始时相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。A组血浆Hcy、ADMA及OX-LDL水平在第12周末时，与本组实验开始及第8周末比较无明显差异性(P＞0.05)。B组大鼠血浆Hcy、ADMA及OX-LDL水平在第12周末时较实验开始及第8周末升高（P＜0.05）。
　　 6.Pearson相关性分析显示:ADMA水平与Hcy、OX-LDL呈正相关(P＜0.01);Hcy水平与ADMA、OX-LDL呈正相关(P＜0.01)。
　　 7.第12周末B组大鼠脑组织DDAH2表达低于同时期A、C、D、E、F及G组，差异有统计学意义(P＜0.05);C、D、E及F组DDAH2表达高于B组，低于A及G组，差异有统计学意义（P＜0.05）;G组DDAH2表达与A差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 8.B组电镜下可见脑血管内皮细胞膜、胞质降解呈模糊不清的絮状，内皮细胞肿胀、崩解，有的阶段崩解脱落的细胞碎块几乎阻塞了管腔;血管周围脑组织水肿，血管旁神经元损伤溃变，细胞器大部分降解，神经元“丢失”。C、D、E、F组损伤轻于B组，可见动脉内皮细胞部分状态尚好，血管内膜增厚，细胞质内部分细胞器结构可分辨;周围脑皮质小血管局部损害，附近的神经元、神经毡轻度水肿，神经胶质细胞脚板轻度水肿等。G组超微结构是干预组中最好的;可见动脉血管通畅，血管内膜厚度明显减轻，血管壁局部欠清晰，内皮胞质内细胞器尚可分辨;脑组织内小血管通畅，血管外无水肿，神经元及神经毡结构基本正常，突触结构清晰。
　　 结论:高蛋氨酸饲料喂养大鼠可成功建立Hhcy模型，同时引起ADMA及OX-LDL升高，DDAH2表达降低，可对大鼠脑血管结构及功能造成损伤。ADMA与Hcy呈正相关，二者又均与OX-LDL呈正相关，提示三者在合成代谢及致病机制中相互作用，加速氧化应激，形成恶性循环，导致脑血管内皮损伤及功能失调。给予叶酸、维生素B12、普罗布考干预能够有效的降低血浆Hcy、ADMA及OX-LDL水平，进而抑制氧化应激，改善血管内皮功能，从而减轻脑血管及脑组织的损伤，且3种药物联合效果更显著。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1 对象和方法

2 结果

3 讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 非对称性二甲基精氨酸与内皮功能障碍及干预的研究进展

致谢