雌激素对子宫内膜异位症子宫内膜细胞EGF、EGFR基因及蛋白表达的影响

摘要

目的:本研究通过建立在位、异位内膜细胞原代培养模型，对原代培养的异位和在位子宫内膜细胞进行形态学观察，同时予以不同浓度、不同时间雌激素刺激，观察EGF及EGFR基因及蛋白表达的变化情况，从而了解内异症中EGF、EGFR表达与雌激素的关系。
　　 方法:实验标本来自天津医科大学第二医院妇科因内异症行手术治疗患者的异位内膜组织作异位内膜组（17例），同时取因子宫肌瘤合并内异症行子宫切除手术治疗患者的内膜作为在位内膜组（17例），同期住院的因子宫肌瘤行手术治疗患者的子宫内膜作对照组（17例），进行细胞培养，对原代培养的异位和在位子宫内膜细胞进行形态学观察。各组细胞干预方法:①各组细胞给予不同浓度(10-4、10-6、10-8、10-10mmol/L)雌激素培养5d，确定雌激素最佳刺激浓度。②各组细胞予含最佳刺激浓度雌激素的培养基分别培养30min（短效刺激）和5d（长效刺激）。用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测各组细胞的增殖能力，同时应用荧光定量PCR技术检测各组细胞中EGFmRNA及EGFRmRNA的表达水平，用ELISA从蛋白水平检测EGF及EGFR蛋白的表达水平。
　　 结果:(1)体外培养内异症的异位内膜细胞、在位内膜细胞和对照组细胞生长曲线非常接近，各组细胞的倍增时间均出现在第3d，于第6d各组细胞的增殖能力均出现下降。在倒置显微镜下观察，异位内膜细胞与在位及对照组内膜细胞的外观特征相似，异位内膜间质细胞形态较在位及对照组内膜间质细胞略小，分散生长，似纺锤状。(2)雌激素刺激可提高异位内膜细胞、在位内膜细胞及对照组细胞的增殖能力，并随着雌激素刺激浓度的增加，各组细胞的增殖能力均增强。(3)异位及在位内膜细胞EGF、EGFR基因及蛋白表达较对照组内膜细胞这两者表达均增高，差异均有统计学意义(P＜0.05)，且EGF、EGF基因及蛋白表达具有雌激素浓度依赖性，各组细胞内不同雌激素刺激浓度之间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。(4)短效及长效雌激素刺激后，异位及在位内膜细胞的EGF、EGFR基因及蛋白表达较对照组内膜细胞增高，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而雌激素长效与短效刺激之间比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论:(1)选择在位、异位内膜细胞原代培养模型，是一种可靠的方法，所得实验结果具有参考价值。(2)雌激素可使内异症子宫内膜细胞EGF、EGFR基因及蛋白表达增高，这与雌激素的增殖作用相关，且随着雌激素浓度增加或予以雌激素短效及长效刺激后，异位内膜细胞组的EGF、EGFR的基因及蛋白表达较在位内膜细胞组和对照组均增强。(3)异位内膜细胞组及在位内膜细胞组的EGF、EGFR的基因及蛋白表达与雌激素刺激时间长短无关。(4)雌激素对内异症子宫内膜细胞促增殖作用可能与EGF及EGFR的表达增强有关。

目录

声明

摘要

缩略语／符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象和方法

结果

讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述 雌激素及EGF、EGFR与子宫内膜异位症

致谢