N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠肝脏成纤维细胞生长因子21表达影响的初步研究

摘要

研究背景：
　　成纤维细胞生长因子21（FGF21）是成纤维细胞生长因子（FGF）家族的一员，最先由Nishimura等首次于2000年发现，主要在肝脏及脂肪组织合成的内分泌激素，可以以自分泌、旁分泌及内分泌的方式发挥激素样作用，并在糖脂代谢中起重要作用。一项新的研究发现FGF21的产生与氧化应激有关，而N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以通过其自身-SH的还原性及脱乙酰基后生成 GSH的特性，使组织对抗氧化应激的能力增强。NAC能否通过其抗氧化作用调节糖尿病大鼠肝脏的FGF21的表达尚未见相关报道。
　　研究目的：
　　探讨NAC对于DM大鼠肝脏FGF21表达的影响。
　　研究方法：
　　1.以Wistar大鼠为实验动物,予以一次性注射STZ(45mg／kg)建立DM大鼠模型。随机分为NC组、DM组及DM+NAC干预组，观察周期分别为6W和12W。
　　2.定期检测大鼠一般情况及随机血糖、血脂、肝酶学指标及MDA、SOD等指标变化。
　　3.通过免疫组织化学法观察肝脏中FGF21的表达位置及各组FGF21的相对表达量。
　　4.采用Western Blot法检测6W及12W各组FGF21蛋白在肝脏中的表达变化。
　　5.应用实时定量PCR技术检测6周及12周各组肝脏FGF21mRNA的相对表达量。
　　结果：
　　1.成功建立1型糖尿病大鼠模型。
　　2.与同期NC组大鼠比较，DM组及NAC干预组的大鼠其多饮、多尿、多食及消瘦症状明显，体重下降显著（P<0.05），随机血糖升高显著（P<0.05）。
　　3.与同期 NC组比较，DM组及 NAC干预组其肝功血脂均明显升高（P<0.01）；NAC组较同期DM组相比ALT、TG均有所改善，统计学差异显著（P<0.05），AST、TC有下降趋势，但差异不显著。
　　4.与同期NC组比较，DM组及NAC组其MDA水平均明显升高，SOD活性均明显降低（P<0.01）；NAC同期 DM组相比 MDA水平有所下降，SOD活性有所上升，差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　5.免疫组化结果显示FGF21表达于肝细胞胞浆，以中央静脉周围较丰富，与NC组相比DM组表现为棕黄色颗粒的先增加后减少，NAC干预组则表现为棕黄色颗粒的逐渐增加。
　　6.Western-Blot结果显示Western blot结果显示DM6周组及NAC6周组FGF21表达量显著高于同期NC组，差异具有统计学意义(P<0.05)。DM12周组FGF21表达量明显低于同期 NC组，差异具有统计学意义(P<0.05)，NAC干预12周组的FGF21表达量则明显高于同期对照组。且随着时间的延长糖尿病组FGF21蛋白表达量呈先升后降趋势，而NAC干预组则呈逐渐上升趋势。
　　7.实时定量PCR结果显示：DM6W组FGF21mRNA相对表达显著高于同期NC组及NAC干预6W组，统计学差异显著(P<0.05)；DM12 W组FGF21表达量明显低于同期NC组及NAC干预组，统计学差异显著(P<0.05)。随着观察周期的延长，DM组及NAC干预组FGF21mRNA的表达均呈先升后降趋势。
　　结论：
　　1.糖尿病可造成肝脏损伤，并造成氧化抗氧化系统的不平衡。
　　2.6周及12周正常对照组大鼠其肝脏FGF21mRNA相对表达量及FGF21蛋白表达量均无明显差异。
　　3.与正常对照组相比，糖尿病组及NAC干预组肝脏FGF21的mRNA相对表达量均呈先升后降趋势。
　　4.随糖尿病时间的延长，糖尿病组肝脏FGF21蛋白表达量呈先升后降趋势；干预组肝脏FGF21蛋白表达呈逐渐上升趋势。
　　5.NAC可能通过抗氧化应激作用保护肝脏，增加FGF21的表达，最终使脂代谢紊乱减轻。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

对象与方法

1.1研究对象

1.2研究方法

结果

2.1 DM大鼠造模完成

2.2各组生化指标及氧化抗氧化指标结果

2.3各组大鼠肝脏FGF21表达量的检测结果

讨论

3.1型糖尿病大鼠模型的建立

3.2糖尿病与氧化应激

3.3糖尿病与肝损伤

3.4糖尿病与FGF21

3.5 FGF21与氧化应激

3.6 NAC对肝脏保护作用

3.7 NAC对糖尿病肝脏FGF21表达的影响及可能机制

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述: 成纤维细胞生长因子21的相关研究进展

致谢