阿托伐他汀与普罗布考联合用药对对比剂急性肾损伤的预防作用及其可能机制的研究

摘要

研究背景及研究目的：
　　对比剂诱导的急性肾损伤（contrast-induced acute kidney injury，CI-AKI)是应用含碘对比剂（contrast media，CM)最重要的临床并发症之一。近20年来，它已成为住院患者发生急性肾衰竭的第三位病因。
　　已有研究报道，阿托伐他汀和普罗布考对预防CI-AKI是有益的，但是，对这两种药物联合用药的效果仍知之甚少。
　　CI-AKI的发病机制包括炎症反应和氧化应激。他汀类药物的抗氧化和抗炎作用均有助于预防 CI-AKI。近年来，有一些研究显示阿托伐他汀可以抑制内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）诱导的细胞凋亡。然而，阿托伐他汀是否可以通过抑制ERS诱导的细胞凋亡通路以发挥其预防CI-AKI的作用尚无报道。
　　近几十年，已发现许多可作为早期检测CI-AKI的新型生物标志物。已有一些试验显示了丛生蛋白（clusterin，CLU）在AKI中的生物标志物作用。然而，关于CLU是否可以作为CI-AKI的新型生物标志物，目前尚无报道。
　　本研究拟探讨不同剂量的两种药物联合应用对肾功能的保护作用；探讨阿托伐他汀是否可以通过抑制 ERS诱导的细胞凋亡通路以发挥其预防 CI-AKI的作用；明确CLU是否可以作为CI-AKI的新型生物标志物。
　　方法：
　　1、入选220名患冠心病的患者，这些患者均拟接受冠状动脉造影（coronary angiography，CAG)和/或经皮冠状动脉介入术（percutaneous coronary intervention，PCI）治疗。这些患者术前24-48小时被分为三组：（1）联合治疗低剂量组(LDC，n=54)：阿托伐他汀20mg每晚1次及普罗布考0.25g每日2次，术前无强化剂量；（2）联合治疗高剂量组(HDC，n=73)：阿托伐他汀40mg每晚1次和普罗布考0.25g每日3次，并术前2h顿服阿托伐他汀40mg普罗布考0.5g；（3）单药治疗组(HDA，n=93)：阿托伐他汀40mg每晚1次，术前2h顿服阿托伐他汀40mg。患者的尿素氮、血肌酐、尿酸分别在术前24小时和术后48小时采集，并计算相应的肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate，eGFR)。
　　2、30只Wistar大鼠，随机分为3组：对照组（N组）、对比剂模型对照组（NC组）、阿托伐他汀组（D组）。予注射对比剂前1周至后2天，D组每天给予阿托伐他汀30mg/kg灌胃，N组与NC组每天给予等体积溶液灌胃。灌胃1周后予对比剂泛影葡胺静脉注射（NC组与D组），或等量生理盐水注射（N组）。注射对比剂后72h处死，取出肾脏，左肾福尔马林固定，用于HE染色和TUNEL染色。右肾保存于-80℃用于蛋白和mRNA检测。
　　3、采用SPSS19.0统计软件包进行统计分析。计数资料以频率和百分率表示，采用χ2检验、Fisher精确检验或Fisher-Freeman- Halton精确检验。计量资料以均值±标准差（(x)±s）表示，组内比较采用配对样本 t检验或Wilcoxon-Rank检验；组间比较采用独立样本 t检验、单因素方差分析、方差分析LSD检验、方差分析Tukey's Post-hoc检验、Mann-Whitney U检验或Kruksal-Wallis检验。P﹤0.05为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1、9名患者发生了CI-AKI，发生率为4.7％。HDC组发病率低于LDC组和HDA组，但无统计学差异。LDC组和HDA组术后的血肌酐显著升高且eGFR显著降低，但HDC组这两个指标的变化无统计学差异。HDC组术后肌酐显著低于HDA组。三组间血肌酐和eGFR的变化的绝对值均无统计学差异。三个治疗组患者术后尿素氮均显著下降，LDC组和HDC组患者术后尿酸也显著降低。HDC组尿素氮、尿酸变化的绝对值较 HDA组低。评估高危患者CI-AKI的发病率可见，高危险评分的患者和糖尿病患者CI-AKI的发病率显著升高。在基础伴有轻-中度肾功能不全的患者中，女性患者和年龄>70岁患者CI-AKI的发病也显著升高。
　　2、对比剂泛影葡胺能够引起大鼠肾小管细胞发生明显凋亡；NC组 GADD153表达量较N组和D组显著升高，caspase-12蛋白表达量也显著升高；然而，检测GRP78的结果却有所不同，3组间差异未见统计学意义。D组较NC组凋亡细胞数明显减少，凋亡指数较 NC组显著降低。D组 GADD153、caspase-12表达量均较N组略高，但无统计学意义。
　　3、NC组Clusterin蛋白表达量较N组显著升高；Clusterin mRNA的表达也较N组显著升高。
　　结论：
　　1、短期高剂量阿托伐他汀和普罗布考联合用药可能比低剂量联合用药或单独高剂量阿托伐他汀更好地保护肾功能，从而预防CI-AKI的发生；糖尿病患者和高危险评分的患者是发生CI-AKI的高危人群，伴基础轻-中度肾功能不全的女性患者和年龄>70岁患者也有较高的患病风险。
　　2、细胞凋亡可能参与了泛影葡胺诱导的CI-AKI的发生；而ERS诱导的细胞凋亡通路（至少部分）在其发病中发挥了作用；阿托伐他汀对泛影葡胺所致大鼠CI-AKI的发病有良好的预防作用，这种预防作用可能是通过抑制细胞凋亡实现的，其抑制细胞凋亡的作用可能是通过抑制 ERS诱导的细胞凋亡通路实现的。
　　3、CLU是检测CI-AKI发生的可能的新型生物标志物。

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缩略语

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、短期阿托伐他汀与普罗布考联合用药对对比剂诱导的急性肾损伤的预防作用

1.1对象和方法

1.2结果

1.3讨论

1.4小结

二、阿托伐他汀预防CI-AKI的机制-内质网应激通路

2.1材料和方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

三、丛生蛋白——CI-AKI的新型生物标志物？

3.1材料和方法

3.2结果

3.3讨论

3.4小结

全文结论

论文创新点

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:对比剂诱导的急性肾损伤的危险因素及危险评分系统

致谢