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目录
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、材料和方法
1.1实验动物
1.2主要试剂及试剂盒
1.3主要实验仪器、设备
1.4.实验动物及实验分组
1.5. 动物实验仪器、实验大鼠造模方法
1.6.大鼠神经功能缺陷综合评分
1.7.脑组织甲苯胺蓝染色实验
1.8. Western-blot 测定大鼠皮层 RIPK-1, RIPK-3, FADD, PARP-1, Caspase-3, Caspase-8, TNF-α, TRAIL, and FasL的表达
1.9 Real-time PCR步骤
1.10 HE染色观察脑组织损伤程度
1.11 脑组织免疫组化实验方法及步骤
1.12 脑组织DNA免疫荧光实验方法及步骤
1.13 透射电子显微镜检测脑组织坏死后亚细胞结构变化
1.14 Fluoro-Jade.C (FJC)脑组织染色观察神经元坏死情况
1.15 多普勒大鼠脑组织脑血流量检测
1.16 统计学处理:
1.17 实验细胞
1.18 细胞实验主要试剂
1.19 溶液配制
1.20 实验仪器及耗材
1.21 细胞实验
1.22.统计学方法
二、结果
2.1 大鼠颅脑创伤模型建立
2.2 HT对蛋白及mRNA表达水平的影响
2.3 透射电镜观察大鼠TBI造模后神经元胞核及线粒体结构
2.4.亚低温治疗TBI大鼠可减轻皮层损伤灶,降低神经细胞凋亡
2.5.脑组织切片行甲苯胺蓝染色评估打击速率对脑组织损伤的影响
2.6. FJC染色评价TBI大鼠神经元变性坏死
2.7.脑组织内RIPK-1, RIPK-3, FADD, PARP-1, Caspase-3, Caspase-8, TNF-α, and FasL免疫组织化学染色结果
2.8. 脑组织内TRAIL+PARP-1+DNA免疫荧光三染
2.9. 多普勒超声脑血流量检测结果
2.10 细胞实验
讨论
3.1 颅脑创伤及可控性皮质损伤装置建立颅脑创伤模型
3.2 TBI与坏死性凋亡通路
3.3 亚低温阻断TBI后细胞坏死性凋亡通路
3.4 RIPK-1与坏死性凋亡通路
3.5 RIPK-1–RIPK-3 坏死性凋亡诱导蛋白复合体调节程序性坏死受上游信号分子调控
3.6 TBI后FADD在RIPK-1介导的坏死性凋亡通路中的作用
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述: 受体相互作用蛋白激酶-1在创伤性脑损伤后神经细胞坏死性凋亡过程中的作用
致谢